王 轶 李军伟 孙南叶
平顶山市疾病预防控制中心检验科，河南平顶山 467001
[摘要] 目的对平顶山市2011年手足口病实验室检查结果进行分析, 了解2011年平顶山市手足口病病原学特征, 为实验室诊断手足口病提供参考。方法采集2011年平顶山市各地送检的499例手足口病患者的粪便、肛拭子、咽拭子、疱疹液和脑脊液等标本507份，应用RT-PCR技术检测样本中的肠道病毒、肠道病毒71型( EV71) 、柯萨奇病毒A组16型( CA16)。结果499例手足口病患者的507份各类样本中, 检测到肠道病毒（PE）阳性84份，EV71病毒特异性基因片段阳性167份, CA16特异性基因片段阳性125份。499例手足口病病例中, 阳性376例，阳性率75.35%；其中EV71阳性167例，占阳性人数44.41%，CA16阳性共125例，占阳性人数33.24%， EV71的检出率较CA16高。已检验499例中，重症患者133例， 阳性109例，阳性率81.95%；其中EV71共91例,占阳性人数83.49%，CA16共9例，占阳性人数8.26%。结论EV71是2011年平顶山市手足口病的优势病原体；同时EV71是引起手足口病重症病例的主要毒株类型。
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关键词 ] 手足口病;逆转录-多聚酶链反应;肠道病毒属;肠道病毒71型；柯萨奇病毒A组16型
[中图分类号] R725.1 [文献标识码] A [文章编号] 1672-5654（2014）06（b）-0036-02
[作者简介] 王轶（1980- ），女，研究生，汉族，河南平顶山人，检验主管技师，主要从事微生物研究方面的工作，Email:378962445@qq.com。
手足口病（Hand-foot-mouth disease, HFMD）是全球性传染病，世界大部分地区均有此病流行的报道，此病流行无明显的地区性，一年四季均可发病，以夏秋季多见，由多种肠道病毒引起， 以肠道病毒71型（Human enterovirus 71 ，EV71 ）和A组柯萨奇病毒16型（ Coxsackievirus A16 ，CA16）为主要病原引起的丙类传染病。大多数患者症状轻微，主要症状为手、足、口腔等部位的斑丘疹、疱疹，少数病例可出现脑膜炎、脑炎（以脑干脑炎最为凶险）、脑脊髓炎、肺水肿、循环衰竭等，个别重症患儿病情进展快，可导致死亡[1]。多发于学龄前儿童，尤以3岁以下年龄组发病率最高。病人和隐性感染者均为传染源，主要通过消化道、呼吸道和密切接触等途径传播。为了解平顶山市手足口病的流行特征，对平顶山市手足口病的综合防治提供参考依据，现将2011年平顶山市手足口病病原学监测结果进行总结分析。
1材料与方法
1.1材料
1.1.1样本来源各县、区疾控中心及各医院在2011年送检的可疑病例，聚集性感染病例和所有重症病例样本，其来源有肛拭子和咽拭子、疱疹液等，样本采集后用冰盒运送至实验室。
1.1.2检测试剂用于RNA提取的试剂盒是Mag MaxTM-96viral RNA Isolation kit（Ambion公司），用于核酸扩增的试剂盒是荧光PCR法核酸测定试剂盒（上海之江生物科技有限公司）。
1.2试验方法
将采集的样本按照Ambion公司试剂盒的说明用核酸自动纯化仪提取RNA；采用实时荧光PCR仪对柯萨奇病毒A16型、肠道病毒71型和其他肠道病毒通用的特异性核酸片段进行荧光PCR检测。
1.3统计学分析
采用SPSS 16.0软件进行统计学分析。
2结果
2.1实时荧光定量PCR检测阳性率
平顶山市2011年共采集499例手足口病患者的507份各类样本, 检测到84份肠道病毒阳性，167份EV71病毒特异性基因片段阳性和125份CA16特异性基因片段阳性，EV71病毒、CAl6病毒以及肠道病毒的阳性构成比分别为：44.41%、33.24%和22.34%，以肠道病毒EV71型为主。粪便肠道病毒阳性率为83.90%，咽拭子肠道病毒阳性率为78.33%，疱疹液肠道病毒阳性率为53.33%，脑脊液肠道病毒阳性率为38.16%。见表1。
表1不同类型样本检测结果
2.2手足口与性别的关系
从性别来看，499例手足口病病例中，发病男性患儿315例多于女性184例， 男女比例为1.71:1,男性肠道病毒阳性率远高于女性(χ2＝8.436，P＝0.004＜0.05)，差异具有统计学意义。
表2手足口与性别的关系
2.3阳性肠道病毒患儿的年龄分布
从年龄看手足口病发病年龄主要集中在5岁以下，其中以0~4岁散居或幼托儿童发病最高，占总数的80.56%（402/499）。
表3阳性肠道病毒患儿的年龄分布
2.4手足口重症患者肠道病毒检测情况
在已检验的499人中，重症患者133人， 阳性109人，阳性率81.95%；其中EV71共91人,占阳性人数83.49%，CA16共9人，占阳性人数8.26%。
表4手足口重症患者肠道病毒检测情况
3讨论
手足口病常常由多种肠道病毒共同引起，而EV71和CA16往往是手足口病暴发流行的最主要病原，二者在遗传学上密切相关[2-3]。2011年平顶山市共检测出手足口病阳性数为376份，167份EV71病毒特异性基因片段阳性，125份CA16特异性基因片段阳性，84份肠道病毒阳性，这说明平顶山市手足口病流行的优势病原是EV71，但同时也存在着CA16和其它肠道病毒。根据我国山安徽、山东、上海和北京报道，EV71 与CA16 交替流行，并且不同地域同一时间流行的型别也不一定相同[4]。因此病原学监测对掌握手足口病的流行规律，更加有效进行防控意义重大；从不同类型的样本检测结果看，粪便和咽拭子肠道病毒的检出率较高，均大于70%；从性别来看，499例手足口病病例中，发病男性患儿315例多于女性184例， 男女比例为1.71:1，与男孩喜动的天性有关，这与蒋静等[5]、秦利平等[6]、金祝平等[7]、杜志忠等[8]的男性报告发病数多于女性的结果相同；从年龄看手足口病发病年龄主要集中在5岁以下，其中以0~4岁散居或幼托儿童发病最高，占总数的80.56%（402/499），这符合手足口病的年龄特征，其它文献也有类似报道[9-10] , 可能与婴幼儿自身免疫机制尚未发育完善、免疫力低下有关；从月份看平顶山市3~12月均检测出肠道病毒，7月阳性率缓慢上升，8月出现第一个高峰，到9月份开始下降，以后发病趋于平缓，病例主要集中于每年的7、8月，这个时期平顶山市正值雨季，气候条件适合肠道病毒的生存与传播。
总之，手足口病传染性强，传播速度快，对0~4岁儿童危害严重，至今无特异性治疗方法，亦无疫苗预防。为遏制疫情蔓延，各地要加强疫情监测，将防控工作的重点放在托幼机构。各托幼机构广泛开展卫生教育宣传，养成良好卫生习惯，做到饭前便后洗手、不喝生水、不吃生冷食物、勤晒衣被、多通风。托幼机构和家长发现可疑患儿，要及时到医疗机构就诊，并及时向卫生和教育部门报告，及时采取控制措施。轻症患儿不必住院，可在家中治疗、休息，避免交叉感染。各级卫生部门要做好教育部门手足口病防制工作的技术指导，切实做到早预防、早发现、早诊断、早治疗，一旦发现疫情要采取果断措施，同时做好疫点、疫区卫生处理和传染源管理工作，遏制疫情蔓延。
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[10]杜志忠,刘志强.北京市平谷区2009年手足口病疫情分析[J].职业与健康,2010,26(20):2339-2340.
（收稿日期：2014-03-16）