摘 要：目的 了解某保健食品胶囊(含三七、红景天、枸杞子、五味子和葡萄籽提取物)对实验小鼠抗氧化功能的辅助增强作用。方法 动物实验设3个剂量组(0.225、0.450和1.350 g/kg·bw)和1个溶剂对照组，观察某胶囊对老龄小鼠抗氧化功能的影响。结果 在试验初始、中期、末期，3个剂量组的小鼠体重及增重与对照组差异均无统计学意义；试验末期各剂量组小鼠血清中蛋白质羰基含量差异无统计学意义；与对照组比较，高剂量组的丙二醛(MDA)含量降低、超氧化物歧化酶(SOD)活力增加、谷胱甘肽(GSH)含量升高。结论 含三七、红景天、枸杞子、五味子和葡萄籽提取物为主要原料的某胶囊，对实验动物有抗氧化功能。
关键词：抗氧化实验 老龄小鼠 氧化应激 动物实验
氧化应激是指体内氧化与抗氧化作用失衡、倾向于氧化作用而导致组织损伤[1]。氧化应激的发生，使机体内许多细胞分子生物，如DNA、脂质、蛋白质等易受到自由基引起的氧化损伤，导致细胞和组织功能障碍，并与多种疾病的发生密切相关[2]。因此抗氧化物质研究对各种氧化应激相关疾病的防控意义重大。近年研究表明人工合成抗氧化剂副作用较多，可能对人体多种脏器产生不利影响，故天然的抗氧化物日渐受青睐[2]。本研究对含有多种药食同源成分的某保健食品胶囊进行动物实验，探讨其抗氧化功效。
1 材料与方法
1.1 样品
由某厂家提供的保健食品胶囊，配方组成：三七450 g、红景天450 g、枸杞子500 g、五味子300 g, 提取浓缩制成干膏粉255 g, 再加葡萄籽提取物33.4 g及其他辅料，制成1 000粒(0.5 g/粒)胶囊。人体服用推荐剂量2.7 g/d, 按成人体重60 kg推算折合剂量为0.045 g/kg·bw。
1.2 实验动物
SPF级ICR种雄性8～10月龄小鼠40只(湖南斯莱克景达实验动物有限公司),实验动物生产许可证号：SCXK(湘)2013-0004;实验期间小鼠饲养于22 ℃～26 ℃、湿度50%～56%的屏障环境中。实验动物使用许可证号：SYXK(湘)2015-0012。
1.3 仪器与试剂
动物称量秤、离心机、水浴箱和紫外可见分光光度计等；丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)及蛋白质羰基试剂盒(南京建成生物工程研究所)。
1.4 方法
试验初始、中期、末期均对小鼠进行体重监测。试验初始，采尾尖血制成4%溶血液，用试剂盒测定其MDA水平。根据MDA含量将40只小鼠平均分为1个对照组和低、中、高3个剂量组(0.225、0.450和1.350 g/kg·bw),保证各组试验前MDA值均衡。各剂量组小鼠经口灌胃给予相应剂量的某胶囊内容物，溶剂对照组给予等体积蒸馏水，灌胃1次/d, 灌胃体积为0.2 mL/10 g·bw, 连续30 d。试验末期，采尾尖血测定4%溶血液中MDA含量、全血中GSH含量；摘眼球采血，离心后取血清测定SOD活力及蛋白质羰基含量。
1.5 数据处理
计量数据以x¯±s表示。用Excel 2007、SPSS 19.0软件统计分析。4组数据如果方差齐，则用单因素方差分析进行总体比较；方差不齐时Dunnett法进行多个剂量组与1个对照组均数间的两两比较，P<0.05有统计学意义。
2 结 果
2.1 老龄小鼠体重变化
实验初始、中期、末期，3个剂量组的小鼠体重及增重与对照组差异均无统计学意义，见表1。
2.2 抗氧化试验结果
试验末期各组间小鼠溶血液中MDA含量差异有统计学意义(F=4.16,P=0.013);与对照组比较，高剂量组的MDA含量降低，见表2。
试验末期各组间小鼠血清中SOD活力和全血中GSH含量差异均有统计学意义(F=3.38,P=0.028;F=3.24,P=0.033);与对照组比较，高剂量组SOD活力增加、GSH含量升高；各剂量组小鼠血清中蛋白质羰基含量差异无统计学意义(F=0.54,P>0.05),见表3。
表1 某胶囊对小鼠体重的影响(g)
表2 某胶囊对小鼠4%溶血液中MDA含量的影响
表3 某胶囊对小鼠血清中GSH含量、SOD活力和蛋白质羰基含量的影响
3 讨 论
氧自由基反应和脂质过氧化反应在机体代谢中起重要作用。MDA是机体内自由基作用于脂质过氧化的终末产物，大量产生时可导致细胞膜损伤[3]。SOD是生物体中清除自由基的主要物质，SOD水平常作为象征衰老的直观指标[4]。GSH是机体内一种强抗氧化剂，可消除自由基并参与细胞解毒及细胞损伤修复，有抑制脂质过氧化、保护细胞膜、恢复细胞功能的作用[5]。蛋白羰基是机体内多种氨基酸在蛋白质氧化修饰过程中产生的早期标志，能直接反映蛋白质的损伤程度[6]。
本研究样品胶囊以三七、红景天、枸杞子、五味子和葡萄籽提取物为主要原料。研究表明三七多糖有较强的体外抗氧化活性[7],明显降低血清中的MDA含量，并提高GSH-Px活力[8];红景天中主要抗氧化物质包括红景天苷和黄酮类物质。侯红平等[9]发现红景天苷的抗氧化作用可有效保护慢性阻塞性肺疾病体外细胞模型，但机体摄取红景天提取物有最佳剂量，剂量过大时反而降低机体的抗氧化能力[10];苗婷婷等[11]研究发现枸杞多糖可能通过清除自由基、提高抗氧化酶活性、上调免疫应答、抑制神经系统的老化、调节细胞凋亡等途径延缓衰老进程。多项动物实验表明枸杞多糖可通过提高小鼠体内SOD活性、降低MDA含量[12],降低氧化产物含量[13],起到延缓衰老的作用；有研究发现，五味子提取物有效成分不仅可直接清除自由基[14],且对皮肤细胞的氧化应激有保护作用[15]。此外五味子中多糖[16]、总木脂素类成分及五味子乙素[17]有良好的抗氧化能力；方欢乐等[18]发现葡萄籽原花青素对D-半乳糖致衰老模型小鼠氧化应激反应的各项生化指标及肝脏组织病理状态有一定改善作用，且葡萄籽对SD大鼠无胚胎毒性和致畸毒性，安全性较高[19]。
本研究用的样品胶囊以几种药食同源物质合理配伍，其中1.350 g/kg·bw剂量能降低小鼠血中MDA水平、提高小鼠血清中SOD活力、提高小鼠全血中GSH含量，说明该胶囊内容物可降低动物体内脂质过氧化程度、增加抗氧化酶抑制自由基反应能力及增强机体受到的氧化压力程度，实验结果与以上单个成分的抗氧化资料基本类似。本研究各剂量组小鼠血清中蛋白质羰基含量与对照组差异均无统计学意义，说明此胶囊对动物体内蛋白质氧化损伤的保护作用不明显，也可能由于动物血清中蛋白质羰基含量较低，检测值存在较大的人工误差。
综上所述，提示含有三七、红景天、枸杞子、五味子和葡萄籽提取物为主要原料的某胶囊，对实验动物有抗氧化功能。
参考文献
[1] Al Shahrani M,Heales S,Hargreaves I,et al.Oxidative Stress:Mechanistic Insights into Inherited Mitochondrial Disorders and Parkinson’s Disease[J].J Clin Med,2017,6(11):100.
[2] 高冬，任成蓉，宋光运.氧化-抗氧化状态与临床疾病的相关性[J].海峡预防医学杂志，2015,21(2):24-26.
[3] Huang YY,Wu CC,Ye YB,et al.The increase of ROS caused by the interference of DEHP with JNK/p38/p53 pathway as the reason for hepatotoxicity[J].Int J Environ Res Public Health,2019,16(3):1-16.
[4] 李红波，王小琴，熊飞，等.六味地黄丸对D-半乳糖致衰老大鼠抗氧化功能影响的实验研究[J].中国中医药科技，2019,26(1):35-37.
[5] 张艺，叶升.还原型谷胱甘肽生理功能及其临床应用[J].生命的化学，2020,40(12):2226-2235.
[6] 罗胜勇，栗原博，乐智勇，等.冬虫夏草对氧化损伤小鼠抗氧化作用研究[J].食品研究与开发，2019,40(13):63-67.
[7] 黄上峰，陆飞燕，黄元河，等.三七多糖抗氧化活性研究[J].微量元素与健康研究，2018,35(1):30-32.
[8] 周艳梅，马妮，高明菊，等.三七葡萄籽软胶囊抗氧化功能实验研究[J].人参研究，2020,32(2):40-42.
[9] 侯红平，张广平，高云航，等.红景天苷对慢性阻塞性肺疾病体外细胞模型的保护作用及抗氧化应激机制[J].中药新药与临床药理，2020,31(12):1389-1393.
[10] 罗兰.红景天提取物对运动小鼠抗氧化能力的影响[J].中国老年学杂志，2018,38(23):5815-5817.
[11] 苗婷婷，严青，王君洁，等.枸杞多糖抗衰老研究进展[J].亚太传统医药，2019,15(6):178-180.
[12] 刘晴.枸杞多糖对CCl4诱导的大鼠肝纤维化的保护作用及机制研究[D].南京：南京农业大学，2016.
[13] 王彩霞.枸杞多糖对衰老小鼠皮肤组织总抗氧化能力及脂褐质的影响[J].中国民族民间医药2020,29(6):7-9.
[14] 李振，孟宪纬，管延珍，等.南、北五味子提取物的抑菌及抗氧化作用研究[J].中国调味品，2017,42(1):28-30.
[15] 曹波，路婷婷，魏菲，等.南五味子提取物对UVB辐射的防护作用观察[J].中国皮肤性病学杂志，2016,30(8):771-775,798.
[16] 王珊珊，李泰雅，谷舞，等.北五味子多糖热水浸提工艺优化及体外抗氧化性能研究[J].粮油食品科技，2017,25(1):64-69.
[17] 马莹慧，冯波，朱鹤云，等.北五味子中总木脂素类成分的抗氧化及抗炎活性研究[J].食品研究与开发，2019,40(11):25-29.
[18] 方欢乐，于晋茹，陶炎炎，等.葡萄籽原花青素抗衰老作用的研究[J].食品与药品，2020,22(6):448-452.
[19] 赵康涛，林健，林蔚，等.葡萄籽提取物对SD大鼠妊娠及胎仔的影响研究[J].海峡预防医学杂志，2020,26(5):42-44.