谢小丽
湘潭市湘钢医院，湖南湘潭 411101
[摘要] 目的 探讨乳腺浸润性导管癌患者癌组织c-Met 蛋白的表达及病理意义。方法 选择本院2008年1月—2013年5月本院乳腺浸润性导管癌患者78例的临床病理标本，采用免组化方法检测乳腺癌组织中c-Met 蛋白的表达情况，分析c-Met 蛋白表达与肿瘤大小、淋巴转移、TNM分期及肿瘤病理分级的关系。结果 c-Met 蛋白在不同肿瘤大小及病理分级乳腺癌组织中表达阳性率差异无统计学意义（P>0.05）；c-Met 蛋白在有淋巴结转移及TNM分期Ⅲ—Ⅳ期乳腺癌组织中表达阳性率明显高于无淋巴转移及TNM Ⅰ—Ⅱ期乳腺癌组织，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 在乳腺癌组织中随着淋巴转移及TNM分期的增高c-Met 蛋白表达增加，提示其可能与肿瘤的进展及侵袭和转移有重要意义。
[教育期刊网 http://www.jyqkw.com
关键词 ] 乳腺浸润性导管癌；c-Met 蛋白；淋巴转移；病理
[中图分类号] R273 [文献标识码] A [文章编号] 1672-5654（2014）03（c）-0120-02
目前全球乳腺癌发病率一直呈上升趋势，近年我国乳腺癌发病率的增长速度明显高于发达国家，国内肿瘤登记地区乳腺癌发病率位居女性恶性肿瘤的第1位。c-Met 蛋白是由c-Met原癌基因编码的一种蛋白产物，研究显示c-Met 蛋白参与细胞色素细胞信号传导和骨架重塑，其与肿瘤细胞的增殖分化、浸润转移以及血管生长有密切关系[1]。国外有学者研究显示在多种肿瘤的发展和转移过程中，均可见c-Met 蛋白的过度表达和基因扩增[2]。本文笔者选择本院近年收治的乳腺浸润性导管癌患者，采用免疫组化法研究c-Met蛋白的表达与乳腺癌病理特征的关系，报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择本院2008年1月—2013年5月本院乳腺浸润性导管癌患者78例的临床病理标本，全部患者均为女性，年龄31~62岁，平均45.5±3.8岁。其中肿瘤直径＜2 cm 16例，肿瘤直径2~5 cm 54 例，肿瘤直径＞5 cm 8例；TNM分期：Ⅰ期12例，Ⅱ期46例；Ⅲ期16例，Ⅳ期4例；病理分级：Ⅰ级13例，Ⅱ级45例，Ⅲ级20例；出现淋巴转移40例，无淋巴转移38例。
1.2 方法
全部石蜡病理切片首先进行脱蜡及水化处理，微波法修复抗原，室温下滴加抗原修复液10 min，然后滴加正常山羊血清封闭液 20 min，甩去多余液体，不洗。然后滴入美国 Zymed 公司生产的兔抗人 c-Met 多克隆抗体，在37 ℃下孵育30 min后放入冰箱12 h，设置冰箱温度为4 ℃；然后取出切片复温后，每张切片滴加二抗50μL，在37℃下再次孵育40 min，孵育完成后，洗涤并采用苏木素衬染，最后于显微镜下观察蛋白表达情况。
1.3 观察方法
每张切片选择3个高倍视野进行肿瘤细胞计数，并统计每张切片的阳性细胞率及阳性细胞染色强度，阳性细胞以胞膜出现棕黄色颗粒状染色为标准。c-Met蛋白表达情况以阳性细胞百分比及染色强度评分进行判定，具体评分方法教育期刊网 http://www.jyqkw.com
参考文献[3]，无色0分，浅黄1分，深黄2分，棕黄色3分；染色强度评分×阳性细胞百分比结果大于1为。c-Met蛋白表达阳性，结果≤1为c-Met蛋白表达阴性。
1.4 统计学方法
数据采用Excel2003录入，以SPSS 17.0统计学软件进行数据分析，计数资料采用Fisher确切概率法或Pearson χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。
2结果
本组78例患者病理标本中，34例c-Met 蛋白阳性，占43.6%。c-Met 蛋白在不同肿瘤大小及病理分级Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级乳腺癌组织中表达阳性率差异无统计学意义（P>0.05）；c-Met 蛋白在有淋巴结转移及TNM分期Ⅲ—Ⅳ期乳腺癌组织中表达阳性率明显高于无淋巴转移及TNM Ⅰ—Ⅱ期乳腺癌组织，差异有统计学意义（P<0.05）。具体见表1。
3 讨论
c-Met 为肝细胞生长因子受体，具有酪氨酸激酶活性，c-Met位于人体七号染色体的长臂上，包含21各外显子，其中有许多细胞生长调控序列[4]。c-Met在不同细胞或细胞不同分化阶段其具体功能不同，主要功能有促进肝细胞、内皮细胞的分裂，诱导细胞形态改变，在胚胎发育过程中控制细胞的移动。c-Met蛋白是由c-Met原癌基因编码的一种蛋白产物，c-Met基因及c-Met 蛋白参与调控肿瘤细胞的增殖分化和转移，国外有学者研究显示在多种肿瘤的发展和转移过程中，均可见c-Met 蛋白的过度表达和基因扩增，并且c-Met 蛋白的高表达很可能是c-Met基因扩增、转录增强的结果[5]。研究显示c-Met的激活是癌症的发展的一个重要因素，c-Met主要通过与肝细胞生长因子结合导致自身受体磷酸化，从而激活酪氨酸，进一步导致多种生长因子底物蛋白质酪氨酸磷酸化，促进组织生长；而多种肿瘤组织中c-Met与肝细胞生长因子均呈现高表达状态，对多种生长因子形成正反馈促进作用，促进肿瘤组织生长和侵袭[6]。
大量研究显示多种肿瘤组织细胞（如乳腺癌、甲状腺癌、前列腺癌、胃癌、胰腺癌等）的生长与c-Met的高表达有密切联系[7]；本文中乳腺癌患者c-Met蛋白阳性表达率为43.6%，并且c-Met蛋白阳性率与肿瘤大小及病理分级无明显关系，但随着淋巴转移及肿瘤分期的增高，乳腺癌组织中c-Met蛋白阳性率呈正向升高趋势，证实在乳腺癌中c-Met表达与肿瘤转移及进展有关，与文献报道相符。鉴于c-Met在肿瘤发展中的作用，通过干预c-Met表达来抑制肿瘤患者癌肿转移、复发成为肿瘤研究的新方向。目前已近有学者研究证实通过miR-340靶向抑制 c-Met 可抑制乳腺癌细胞的迁移和侵犯[8]，但是其在改善患者生存率方面的效果还需要进一步研究
综上所述，本研究提示，c-Met蛋白的表达在乳腺癌的侵袭和转移中有重要作用，提示临床通过检测或干预c-Met蛋白表达来判断乳腺的发生、发展和患者预后情况，也为乳腺癌治疗提供了新的方向。
[教育期刊网 http://www.jyqkw.com
参考文献]
[1] 刘涛,冯雪华,任志国,等.c-Met在乳腺癌组织中的表达及其临床价值[J].外科理论与实践,2011,16(1):42-44.
[2] 肖芹,范钦和,顾学文.浸润性乳腺癌中Hepsin和c-Met的表达及临床病理意义[J].临床与实验病理学杂志,2008,24(1):37-39.
[3] Ghoussoub RA，Dillon DA，D´Aquila T，et al． Expression of c-met is a strong independent prognostic factor in breast carcinoma[J]．Cancer，1998，82: 1513-1520．
[4] Jiang WG, Parr C, Martin TA，et al. Hepatocyte growth factor, its receptor, and their potential value in cancer therapies[J].Curr Oncol，2007，14(2):66-69.
[5] El-Attar HA，Ragab MS，Sheta MI，et al． Hepatocyte growth factor in Egyptian females with breast benign lumps and cancers[J].AsianPac J Cancer Prev，2010，11: 893-896．
[6] 李宏武,单吉贤.HGF/SF、c-met基因信号异常与胃肠道恶性肿瘤[J].世界华人消化杂志,2003,11(11):1749-1751.
[7] 严家菊,刘靖,张首国,等.以c-met为靶点的酪氨酸激酶抑制剂的研究进展[J].国外医学:药学分册,2012(3):184-191.
[8] Wu ZS，Wu Q，Wang CQ，et al． miR-340 inhibition of breast cancer cell migration and invasion through targeting of oncoprotein c-Met[J].Cancer，2011，117: 2842-2852.
（收稿日期：2013-12-05）