王鹏文 赵 群 田小名
肥城市人民医院普外科，山东肥城 271600
[摘要] 目的 探讨凋亡抑制蛋白BIRC5在肝癌中的表达及其表达与临床病理牲的关系。方法 免疫组化检测BIRC5在20例正常肝组织及80例肝癌组织中的表达，分析其表达与临床病理特征的关系。 结果 BIRC5在肝癌组织中的阳性表达率为66.3%，明显高于正常肝组织（5%），差异有统计学意义（P<0.05）。此外， BIRC5在低分化肝细胞癌中的表达率（83.3%）明显高于高-中分化肝细胞癌（55.4%）；淋巴结转移患者中BIRC5的表达率（85.7%）明显高于无淋巴结转移患者（55.9%）；II-III期患者BIRC5的表达率（83.9%）明显高于I期患者（57.1%），差异有统计学意义（P<0.05）；而BIRC5表达率与年龄、性别、肿瘤最大直径无明显相关（P>0.05）。 结论 BIRC5表达与肝癌的发生密切相关，可能成为肝癌诊断的新型标记物。
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关键词 ] BIRC5；肝癌；临床病理特征
[中图分类号] R735.7 [文献标识码] A [文章编号] 1674-074２（２０１4）09（c）－０073-02
原发性肝癌是一类常见的恶性肿瘤，对化疗药物敏感性差，病程发展迅速，预后不良[1]。肝癌的进展是多基因、多阶段的发展过程，涉及一系列分子事件，导致细胞无限生长并产生恶性表型[2]。目前临床上致力于寻找肝癌新治疗靶点，实现多分子、多通路联合治疗，以期提高治疗效果。肝癌细胞高表达生存素(BIRC5)，是一个潜在的治疗靶点[3]。目前研究表明其表达与多种肿瘤的转移、复发、临床分期、病理分级及多药耐受明显的相关[4]。该研究2009年10月—2012年12月通过免疫组化的方法，研究该基因在肝癌发病过程中的表达水平，明确其表达是否与其临床病理特征相关，为肝癌靶向基因治疗提供实验基础，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
取该院肝癌组织标本80例，肝癌组织远端相对正常肝组织20例。其中，肝癌患者男47例、女33例，年龄47～67岁之间，平均55.2岁；肿瘤最大直径≥5cm27例，<5 cm53例；低分化24例，高-中分化56例；发生淋巴转移转21例，无淋巴转移59例，II~III期31例，I期49例。所有患者术前均未接受放化疗。
1.2 免疫组化
所有组织标本均采用福尔马林固定，石蜡包埋，3 μm厚切片，二甲苯及酒精梯度脱水，pH为7.2~7.4的柠檬酸盐抗原修复液修复，滴加一抗BIRC5（美国santa cruz公司）(稀释比例为1∶100)后4度过夜，复温30 min后PBS漏光，滴加生物素标记二抗（武汉博士德公司）工作液，37 ℃孵育30 min，DAB（北京中杉金桥生物公司）显色，苏木精复染、酒精梯度脱水及中性树胶封片。
1.3 结果判定
随机选取10个高倍视野(物镜40×)进行观察，根据细胞显色强度及阳性细胞百分率综合评价。其中，阳性细胞数记分为：<5％为0分，5％～15％为1分，16％～25％为2分，>25％为3分。着色强度记分为：无色为0分，浅黄色和黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分；以阳性细胞数得分乘以着色强度得分为免疫组化总分，范围：0～9分，≥4分定义为阳性表达，其余为阴性表达。
1.4 统计方法
应用SPSS17.0统计学软件对研究数据进行分析，两样本率计数资料的比较采用χ2检验。
2 结果
2.1 BIRC5在不同肝组织中的表达
免疫组化染色结果显示，BIRC5在正常肝组织中以低表达为主，20例肝癌组织远端相对正常肝组织中有1例（5%）出现BIRC5弱阳性信号，阳性信号散在分布于组织细胞的胞核及胞浆中；在肝癌组织中以高表达为主，80例肝癌组织标本中有53例（66.3%）出现BIRC5强阳性信号，阳性信号位于组织细胞的细胞核内。BI4RC5在肝癌组织中的表达显著高于正常肝组织，两组比较差异有统计学意义（χ2=21.76，P=0.000）。
2.2 BIRC5在肝癌中的表达与其临床病理特征的关系
BIRC5在肝癌组织中的表达与分化程度、淋巴结转移及分期相关，其中，BIRC5在低分化肝细胞癌中的表达率为83.3%，明显高于高－中分化肝细胞癌中的表达（55.4%）；淋巴结转移患者中BIRC5的表达率为85.7%，明显高于无淋巴结转移患者（55.9%）；II-III期患者BIRC5的表达率为83.9%，明显高于I期患者（57.1%），差异有统计学意义（P<0.05）；而与年龄、性别、肿瘤最大直径无明显相关（P>0.05），见表1。
3 讨论
该研究通过观察凋亡抑制蛋白BIRC5在肝癌中的表达及其表达与临床病理牲的关系，评价了BIRC5表达与肝癌发生的关系。该研究结果显示，IRC5在肝癌组织中的阳性表达率明显高于正常肝组织，提示BIRC5可能作为一癌基因参与肝癌的发生。此外，BIRC5在肝癌中的表达与患者的临床病理特征具有密切联系，其中BIRC5在低分化肝细胞癌患者中的表达明显高于高－中分化肝细胞癌组织，提示BIRC5的表达与肝癌细胞的分化有关，高BIRC5表达可能促进肝癌细胞的低分化，促使肝癌细胞的恶性程度增加。此外，BIRC5表达与淋巴结转移及分期密切相关，淋巴结转移患者中的表达明显高于无淋巴结转移患者，II-III期患者中的表达明显高于I期患者。由于淋巴结转移往往影响患者的临床分期及预后，为此我们推测BIRC5的异常表达也参与了肝癌的发展过程，高BIRC5表达患者可能预后不良。该研究提示BIRC5在肝癌中的表达水平与肿瘤恶性、进展程度呈正比，未来临床上可将其作为肝癌诊断新型标记物，提高肝癌诊疗水平。
BIRC5是凋亡抑制蛋白家族IAPs(inhibitor of apoptosis proteins)中结构最简单、抗凋亡作用最强的蛋白分子。目前，BIRC5在多种恶性肿瘤研究中均有报道，梁红玲等[5]报道称 BIRC5在肺癌组织中普遍存在高表达，主要在胞核中表达，少部分可表达于细胞质中，为广谱的分子靶点之一。该研究还提示BIRC5在肺癌男性患者中表达高于女性患者，而该研究中BIRC5与患者性别并未见相关性，可能与肺癌男性患者患者吸烟率较高有关，需要进一步研究。杨瑞、Seth等[6-7] 报道了BIRC5所编码的Survivin在膀胱肿瘤细胞中起到促细胞增殖及调整细胞的生存时间、抑制细胞凋亡的作用，抑制BIRC5基因或下游产物表达，可能会促进膀胱肿瘤细胞凋亡，从而阻止肿瘤生长。储兵等报道称BIRC5参与了鼻咽癌发病过程，在鼻咽癌细胞中表达明显上调[8]。张小丽等[9]研究表明BIRC5参与了大肠癌发病过程，并与淋巴结转移相关。贺荣芳等[10]研究表明BIRC5在恶性淋巴瘤异常呈高表达，并与患者的临床分期相关。BIRC5在细胞凋亡过程中也发挥着重要作用。凋亡失衡的理论贯串于肿瘤发生发展过程中[11]，选择性地干预细胞凋亡信号传导、诱导细胞凋亡程序启动正成为治疗恶性肿瘤的有效疗法。该研究发现在肝癌样本BIRC5表达水平升高，提示对肝癌患者采用针对BIRC5靶点的干预可能是治疗肝癌癌的策略之一。然而，BIRC5在肝癌中的具体作用机理尚不清楚，有待于深入研究。
综上所述，BIRC5在肝癌细胞中呈高表达，其表达水平与肿瘤预后有相关性，因此，BIRC5可作为一个潜在的诊断和治疗靶点应用于肝癌临床诊疗中，未来对BIRC5在肿瘤中的研究应进一步将基础实验和临床实验联系起来，致力于相关抗癌靶向药物的研发。
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参考文献]
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[10] 贺荣芳，谢黎明，赵强，等.恶性淋巴瘤中 E2F1 与 BIRC5 蛋白表达的相关性研究[J].中南医学科学杂志，2012，40（1）：20-23.
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（收稿日期：2014-06-25）