孙传堂，周自强
（江苏省东海县畜禽改良站 222300）
摘要：当前肉牛养殖已成为畜禽养殖业中的一个主要产业，对肉牛进行人工授精技术，通过繁育改良来提高生产性能，最终大幅度增加经济效益。因此，要求技术人员熟练掌握人工授精技术，从而提高母牛的受胎率。现笔者总结多年实践经验，对人工授精技术操作的要点进行概述，供广大肉牛养殖者参考。
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关键词 ：肉牛；人工授精；意义；冻精；发情特征；输精时间；输精
1 概念及意义
肉牛人工授精技术一般分为常温精液和冷冻精液人工授精两种，现在通常是指冷冻精液人工授精，是指对优良种公牛使用采精器械来采集精液，进行一系列处理后保存在-79～-196℃的低温环境中，然后将其通过输精器械输入到发情母牛的生殖道内，母牛受精后发育成胎儿，并生产优良后代犊牛。
饲养种公牛数量可以适当减少，饲养管理成本降低，且优良种公牛的利用率最大程度地提高。如果进行自然配种，一般一头种公牛全年能够配种母牛200～300头；如果将其精液冷冻保存后进行人工授精，使优良种公牛的种用价值被充分利用，配种效率提高，扩大配种母牛的数量，一般达到一头优良种公牛全年能够配种2万～3万头母牛，提高大约100倍。采取人工授精可使精液的利用时间增长，尤其是冷冻精液能够进行长期保存，即使存放20年依旧能够让母牛受精产犊，但保存3～5年的精液可获得最高的受胎率。另外，优良精液能够长期保存，并可经由任一交通工具运输到各个地方进行配种，使良种覆盖面积明显扩大。优良种公牛精液被冷冻保存后，可随时按照需要，在母牛群中实施同期发情和超速排卵等先进技术，从而实现集中配种，促进肉牛品种改良，加速优质、高效、高产肉牛养殖业的发展。
人工授精必须选择符合要求的优质精液，并对母牛采取发情鉴定以掌握适时的输精时间，并在正确的时间将精液直接输入到配种母牛子宫颈内，使其配种受胎率明显提高。选择冷冻精液用于人工授精一般通过直肠把握术，因此在母牛配种妊娠后但表现假发情，也能够及时作出判断，从而避免由于误配而导致母牛流产。公、母牛进行自然交配时，相互之间非常容易传染疾病，特别是生殖道的传染病，而采取人工授精能够有效防止疾病传染，并能够及时发现繁殖疾病，从而采取相应措施进行及时治疗。人工授精过程中，通过直肠检查，可及时对不孕症疾病做出诊断，例如在实际工作中会常常出现一些母牛患有多种不孕症疾病，即使进行多次配种仍旧无法成功受孕，通过及时治疗后，大约有90%可痊愈且成功受胎产犊，效果良好。总之，肉牛冷冻精液改良配种技术，由于细管冻精具有使用非常方便，以及提高受胎率等优点，已被广泛采用。另外，该技术通过保存精液的运输，使母牛配种不再受地域限制，在交换优良种公牛精液，促进品种改良和提高牛群生产性能方面均具有有十分重要的意义。
2 购买冻精的注意事项
购买优良中公牛冻精的目的有两个，即能够使母牛配上母犊，并希望所产后代母牛给养殖者增加经济效益。因此，购买的种公牛冻精必须符合两个基本要求，即冻精具有优秀的遗传品质，且冻精活力完全符合规定的标准。我国农业部规定，人工授精中选用的冻精活力必须高于0. 35。对公牛遗传品质进行评估的最佳方法是对其后裔进行测定，如果只根据父母代的表现来判断所产后代犊牛的遗传品质并非可靠，因此购买那些后裔经过测定的优秀种公牛的精液，才能够确保牛群有效改良。种公牛冻精的选购主要是根据冻精成活率和遗传品质确定，但在实际的购买过程中，还要从多个方面进行综合考虑。需要查阅肉牛群中曾经使用过哪些种公牛冻精，购买新的种公牛冻精要与之前使用的种公牛具有亲缘关系，这样能够防止近交系数的上升过快。对整个牛群中存在的缺陷进行分析，并与经济价值较好的性状相结合，以确定哪些性状最需要进行改良。为降低冻精成本，可以将青年公牛和验证公牛的冻精数量按照一定比例进行搭配使用，一般是前者占30%，后者占70%，必须确保在实际使用中、优秀验证中公牛的冻精占主导地位，以保证整个牛群的改良趋势。同时，在一定范围内使用青年公牛冻精，能够使世代间隔明显缩短，从而促进遗传进展。另外，所购买的种公牛冻精的遗传品质必须在母牛群的遗传水平之上，新购买的种公牛冻精的遗传品质比之前使用的公牛冻精优良。
3 冷冻精液的保存和解冻
为确保冷冻精液品质，使其精子活力保持较高水平，在保存与取用过程中要注意以下几个方法。冷冻精液保存过程中，要定期进行称重，从而及时补充液氮，通常在液氮量低于整个液氮罐容量的1／3时则要进行添加，同时罐内装有精瓶的提漏不能够暴露在液氮外面。将精液颗粒从液氮罐内取出时，提漏不能够提出液氮罐口外，必须确保提漏处于罐颈下部，使用长柄镊夹取精液颗粒。液氮罐每年进行1～2次清洗，清洗过程中或者将贮精瓶转移到另一超低温容器时，动作越快越好，贮精瓶暴露在空气中的时间不允许超过3秒。冷冻精液保存在液氮罐中，要尽可能减少开盖时间，避免液氮过多消耗。装有冻精的液氮罐要放置在阴凉、干燥、通风良好、清洁的地方，运输过程中禁止发生碰撞。
使用冷冻精液前要进行解冻，一般选择2. 9%柠檬酸钠溶液对颗粒冻精进行解冻。解冻时，先灭菌的试管中加入1毫升之前配制好的2. 9%的柠檬酸钠溶液，然后将该试管置于38～40℃的温水中预热，再从液氮罐中取l粒颗粒冷冻精液快速放入装有的解冻液且经过预热的试管中，轻轻晃动使其解冻，注意不能够用手搓试管来助溶，防止精子间相互发生碰撞而降低活力。冻精解冻必须置于显微镜下检查精子活力，符合规定的则要及时用于输精，一般在1小时以内必须输精。如果对细管冻精进行解冻，将其从液氮罐中取出后直接置于40℃左右的温水中轻轻晃动5～10秒，当细管内的精液颜色发生改变时要马上取出，用经过灭菌消毒的剪刀将细管封口的一端剪去，然后直接装在专用的细管金属输精器上，显微镜下检测活力符合规定后才可进行输精。人工授精中，要求精子活力必须高于0. 35，即精液中超过1/3的精子呈直线运动，这样才能够用于输精。
4 母牛发情特征
母牛年龄、膘情以及饲养气候环境等因素均对其是否能够正常发情以及持续时间的长短有影响，因此要根据母牛品种、年龄、膘情、胎次和卵泡变化来进行准确判断，把握好输精时机。母牛的发情期较短，但表现出明显的外部特征，因此母牛的发情状况可以主要依靠外部观察来鉴定。
母牛发情时，外部表现出强烈的性行为，内部的生殖实质器官、生殖激素也会发生明显变化。因此，母牛发情要进行综合判定，即以外部观察性行为为主，触摸卵巢为辅。发情初期，即母牛开始发情时，表现出兴奋不安，频繁哞叫，有时流眼泪，常常有公牛跟随并欲爬跨，但拒绝公牛爬跨，母牛阴道流出少量透明黏液。发情盛期，母牛表现非常安静，排尿频繁，外阴部充血肿胀，黏膜潮红，并开始接受公牛爬跨，这时阴道中流出大量透明黏液，呈现玻璃棒状，且不易被扯断。发情末期，虽然此时仍有公牛欲爬跨母牛，但其已稍感厌倦，大多数拒绝爬跨，但少奔跑，此时阴道流出的透明黏液减少，稍并混杂少量乳白色丝，黏性减弱，此时进行输精为好。为进一步确定输精时间，可采取直肠检查法触诊直肠，手摸感到卵泡停止增大，且紧张性增高，泡壁变薄，有一触即破的感觉，此时输精最好。
5 输精时间
母牛在饲喂合理日粮的前提下，大多数在产后40～50天出现第一次发情，该情期往往会出现发情但不排卵或排卵而不出现发情征兆，在产后60～70天达到第二个情期。但如果母牛产后营养不足以及饲养环境恶劣时，其发情明显受到抑制。另外，母牛产后恶露的排除对其下次配种时间也有影响。正常情况下，母牛产后10～12天可排净恶露，对于过于瘦弱、产双胎以及难产母牛，往往会延长到40天左右，子宫复原几乎与恶露排净同步完成。因此，经产母牛产后60～90天是最佳配种时机，此时配种能够实现一年一胎的繁殖水平。正常情况下，母牛在发情旺期的5～18小时内输精较为适宜。在发情旺期的5～8小时，即母牛表现为接受爬跨，频频哞叫，阴户肿胀并有大量透明黏液分泌，此时可以进行第一次输精；当母牛阴户湿润、轻度肿胀、潮红且黏液开始变稀、不透明时进行第二次输精。
母牛发情一般可持续18小时，并发情结束后10～15小时开始排卵，而卵子具有活力的时间为18～20小时，加之精子在生殖道内24～50小时才具有受精能力，但精子需要消耗2～13小时才能够进入受精部位，还需要3～4小时才能够实现精子获能，因此两次输精要有8～12小时的间隔。大多数母牛在夜间排卵，为此实际生产过程中要在夜间进行输精或者次日清晨进行输精，从而提高受精率。对与老、弱母牛，其发情持续时间较短，要适当提前配种。
6 输精
在肉牛进行人工授精时，一般采取直肠固定子宫颈输精法，母牛采用该输精方法比其他输精方法的受胎率提高15%～20%。将输精母牛牵入输精栏内，尾巴拉向一侧并进行固定。输精前，输精人员要剪短磨平双手的指甲，卷起袖子，消毒手臂后涂上肥皂沫。输精人员右手五指合拢呈锥形，慢慢插入母牛肛门，掏净直肠内粪便，外阴部用0. 1%的新洁尔灭或2%的来苏儿机械牛清洗消毒，最后用经过消毒的毛布擦干，或者在母牛阴门处用酒精进行消毒，待酒精挥发后才能够进行输精。用右手拇指确定子宫颈口的位置，隔肠壁将子宫颈握住并固定。用左手持准备好的输精枪，在不接触外阴的条件下将其插入母牛阴道前庭的裂隙内，插入过程中要确保动作要轻柔缓慢，先斜向上呈45度角插入10～15厘米，通过阴道前庭之后再稍往下沿水平方向插入阴道内，直至插入子宫颈外缘停止。插入后，输精枪要与直肠内的手保持同步，前端对准子宫颈外口，右手将子宫上下左右轻轻摆动，以便输精枪进入子内。确定输精枪插入子宫5～6厘米左右．则可将精液慢慢压射入子宫内。压射时，可用直肠内的手将子宫稍往下压，使输精枪前低后高，促使精液容易流人，避免发生倒流。如果母牛要开始排卵或卵子已排出时，为了使精子到达输卵管上1／3处的运行时间缩短，提高受精率，可将输精枪直接插入排卵一侧的子宫角内进行输精，也就是采取深部输精，尤其是刚排卵不久的母牛比较适用。输精完成后，先取出输精枪，直肠内的手按压子宫颈片刻后再取出。