李倩1，茹金根2，刘士力1，王雨辰1 ，徐海春2 ，李春妹2，练青平1，胡廷尖1
（1浙江省淡水水产研究所，浙江 湖州 313001；2湖州练市鸿达特种水产养殖专业合作社，浙江 湖州 313013）
摘要：2014年5月17日-5月23日，在浙江省湖州对“台湾泥鳅”人工繁殖技术进行了初步试验。两次试验累计繁育“台湾泥鳅”水花850万尾，孵化率达到80%。通过“台湾泥鳅”激素配方、注射剂量、效应时间等问题的探索，初步得出浙江省地区 “台湾泥鳅”繁殖时间为5月份和适宜水温为24 ℃。还讨论了“台湾泥鳅”的种质、雌雄鉴别、水温及积温对其人工繁殖时间的影响等。
教育期刊网 http://www.jyqkw.com
关键词 ：“台湾泥鳅”；人工繁殖；积温；催产激素配伍
“台湾泥鳅””是我国台湾省水产科技工作者选育出来的新养殖品种。“台湾泥鳅”最适养殖水温28 ℃，不好钻泥，容易捕捉，体型长且略扁，尾宽，头小，口下位，马蹄形，头部无鳞，尾柄长与高约相等，尾鳍圆形，体背部及体侧上半部灰褐色，腹面白色，体侧具有许多不规则的黑褐色斑点。“台湾泥鳅”个体大，成鳅体重在50 g以上，部分可达300 g，目前已知最大的“台湾泥鳅”重达600 g。
2012年，“台湾泥鳅”开始被国内少数养殖单位引进，因个体大、雌雄生长无差异、产量高而引起业界轰动，养殖发展势头迅猛。2013年10月，湖州南浔区湖州练市鸿达特种水产养殖专业合作社引进“台湾泥鳅”夏花，浙江省淡水水产研究所科技人员就冬季亲本培育[1-3]、苗种繁育[4-5]等工作进行了研究。
2014年5月17日-5月23日，笔者在浙江省湖州对“台湾泥鳅”进行了2批次人工繁殖，累计繁殖“台湾泥鳅”水化苗850万尾。试验对“台湾泥鳅”激素配方[6]、注射剂量[7]、注射方式[8]、效应时间等问题进行了初步研究，突破了规模化繁殖[9]关键技术。
1材料和方法
1.1亲本来源及培育
试验用“台湾泥鳅”亲本是湖州练市鸿达特种水产养殖专业合作社于2013年5月25日购买的6万尾4 cm左右苗种培育而得。先在池塘中培育到2013年10月25日，后进入塑料大棚中继续培育。浙江省湖州地区在1月份天气阴冷，池塘水温在4～5 ℃，塑料大棚中的水温仍然保持11 ℃以上。前期所投饵料为连云港泥鳅饵料厂生产的泥鳅专用饵料，后期在塑料大棚中投喂浙江科盛饲料股份有限公司的海水鱼膨化浮（沉）性配合饵料。
1.2催产注射及抓捉器具
催产注射的针头用4.5 mm的短针头，注射器为5 mL医用注射器。抓捉“台湾泥鳅”的器具为笔者研制的费氏专利手套，一般一人戴手套抓住“台湾泥鳅”首尾，另外一人注射催产激素。
1.3催产激素和剂量
催产注射的激素为鱼类常用激素，主要有绒毛膜促性腺激素（HCG）、促黄体素释放激素类似物（LHRH-A2）、地欧酮（DOM）等三种。根据温度再进行配伍及剂量调整。雌雄鳅每尾注射0.5 mL，均采用一次背部肌肉注射。
1.4“台湾泥鳅”的催情及人工授精
1.4.1网箱安装及暂养亲本催情亲本暂养网箱规格为2 m×2 m×1 m，网箱中放置用旧网片扎成束的鱼巢作为引物。亲本暂养网箱置放在池塘中，网箱外有流水，网箱内用小皮管冲注水，网箱顶部用遮光布遮阳；另一部分网箱设置在池塘中。每只箱分别放注射后“台湾泥鳅”20 kg，平均密度为5 kg/m2。注射后的“台湾泥鳅”放入亲本暂养网箱中等待人工授精。
1.4.2人工授精人工授精分三步。第一要适时，耐心等待，认真观察网箱中亲鳅的动静。若发现亲鳅游动渐频，特别是雌鳅上浮水面，则说明发情期来临，这时候试挤压雌鳅腹部会流出金黄色的卵子，卵子游离，说明亲鳅的授精时间到了，应马上开始进行授精。剖腹取出贴在背椎两侧的“台湾泥鳅”精巢，解剖后将2条乳白色的精巢用镊子轻轻取出；然后将其放入研钵中研磨，一般取五条，加入15 mL林格氏液备用。
在制备好精液的同时，将雌“台湾泥鳅”的体表水（特别是生殖孔附件）用干毛巾擦干，一人用毛巾将成熟的雌“台湾泥鳅”裹住，露出肚皮，用手轻轻挤压雌鳅腹部，将成熟卵子挤入干燥的白搪瓷盆；等基本上有300 mL的卵子（收集时间控制在20 min以内）时，另一人将配好精液浇在卵上；一手托住白瓷盆轻轻摇晃，另一手指轻轻搅拌，15秒钟后，加入2 000 mL清水轻轻转动，使卵子与精子充分结合。最后将完成授精操作的卵子放入孵化设备中孵化。
1.5孵化设备及孵化
孵化设备是笔者专利产品。主要用120目及以上绢做成孵化缸型状，底部用铁或者砖块当沉子，中间和上口用直径为5 mm的铁丝撑开，上口离开水面10 cm，防止风浪冲击。用空气曝气头使孵化网中的水翻流起来。用绢做成孵化缸放置在水体中使得孵化管理工作更为简单。
“台湾泥鳅”卵的孵化密度一般为每升水中可放卵3 000～5 000粒，要求水质清新。孵化时间与水温高低直接相关，孵化最适宜的水温为25 ℃，水温高，孵化时间短，水温低，孵化时间会延长。
2试验结果
2.1种鳅的选择与暂养
种鳅要求没有伤、活力强、体表粘液多。雌鳅个体60 g/尾以上，暂养期间要防止鸟类的捕食，减少损失。种鳅具体情况见表1。
2.2催产孵化
从二次试验的结果来看，催产剂配方HCG 800IU ＋LHRH-A2 8 μg ＋DOM 4 mg/尾催产效果较好。“台湾泥鳅”受精卵的孵化率最高为83.8%，最低为74.7%，平均为80.0%。
注： 1 mL卵=2 200粒（刚刚挤出未授精的卵）
鱼苗孵化出后应待大部分仔鱼卵黄囊基本消失后，关小水流向箱内投喂煮熟的蛋黄，每10万尾喂1个蛋黄，1 h后即可下池转入苗期培育。
3讨论
3.1水温和积温对“台湾泥鳅”人工繁殖时间的影响
二次繁殖孵化效率在80%，第一次为74?7%，除积温外，使用饵料质量有关系，由于前期投喂一般泥鳅专用饵料，蛋白质含量（28%）；后期在塑料大棚中才改用蛋白质含量（45%）比较高的海水鱼膨化浮（沉）性配合饵料。由此可见泥鳅繁殖亲本的饵料蛋白质含量应该在45%以上。
“台湾泥鳅”在台湾一般3月下旬开始繁殖，亲本一般要求2足龄。浙江省地区的年度水温积温比台湾低，通常浙江省地区养殖“台湾泥鳅“繁殖时间要推迟。2013年浙江省夏季高温时间特别长，而且我们从10月开始把在池塘养殖泥鳅转入塑料大棚中继续培育，虽然其中浙北地区在1月份天气阴冷，但是塑料大棚中的水温仍然保持11 ℃以上。冬季期间“台湾泥鳅”在塑料大棚中累计得到的水温，比塑料大棚外池塘中多630 ℃·d。笔者认为足够积温是“台湾泥鳅”在浙江省地区人工繁殖成功的重要条件。泥鳅繁殖积温为多少度时性腺发育才完全成熟，有待进一步检测。
从2014年笔者对“台湾泥鳅”性腺发育检查来看，在浙江地区“台湾泥鳅”繁殖时间在5月初可以开始。笔者认为浙江地区“台湾泥鳅”最适繁殖时间在5月底6月初，选择水温在24 ℃～25 ℃之间进行“台湾泥鳅”人工繁殖为适宜。
3.2“台湾泥鳅”雌雄鉴别及人工授精性比
试验用“台湾泥鳅”均为１足龄，粘液较多，体质健壮，无外伤，无畸形。成熟雌雄[10]鳅个体大小基本相同，亲本“台湾泥鳅”的暂养是为了进行人工繁殖时方便亲本♀、♂鉴别，一般要前一天通过网箱收集暂养，网箱规格为5.5 m×3 m×1.5 m，网目为0.3 cm的聚乙烯网箱，网箱上用遮阳布盖住，防止阳光直射和飞鸟吞食。
通过一天网箱收集暂养，体内粪便基本排空，可见成熟的雌鳅腹部膨大柔软，有明显的卵巢轮廓，胸鳍较短，撑开时呈圆扇形，而雄鳅最明显特征是在背鳍后左右侧线鳞上面有长2 cm左右肉质突出，雄鳅个体比雌鳅长，胸鳍较长，末端尖而弯绕。
人工授精性比一般要求雌雄比为5∶1。通常雌雄需要的激素剂量是2∶1，合理的雌雄比有利于减少操作的盲目性，节约激素费用。在试验中发现， “台湾泥鳅” 养殖群体是雌少雄多，人工繁殖过程中至于雄鳅最少比例应该是多少？有待继续研究。
3.3“台湾泥鳅”繁殖有效催产激素配伍
本次实验采用了4 种激素进行注射，实验结果表明，“台湾泥鳅”对LHRH-A2 不敏感，催产效果不好，但和DOM 混合使用，效果很好。LHRH - A2诱导“台湾泥鳅”排卵效果较差，需要的剂量明显大于鲤科鱼类，效应时间也较鲤科鱼类长。这种结果的出现可能是由于混合使用比单独使用LHRH-A2更能有效地促进“台湾泥鳅”血清性类固醇激素的的释放。根据另外介绍，一般常用催产剂为HCG，其用量为每尾注射800 IU，生产中使用是否经济仍然需要进一步扩大试验探索。
3.4人工授精是“台湾泥鳅”繁殖可行方式
国内泥鳅由于人工授精对泥鳅伤害严重，且花费时间多，效率低，不利于规模化生产，通常采取人工催产注射激素后自然产卵[11]。笔者在2次试验中发现，“台湾泥鳅”在催产注射激素后，尽管采取了水体流水刺激，无论网箱设置在流动还是静水体产卵池中，产卵活动均延续5～6 h，没有发现卵粒产出和精子流出。对此，笔者认为“台湾泥鳅”不会自然产卵授精[12]，“台湾泥鳅”只能采取人工授精繁殖方式。在什么条件下让它自行产卵，因受诸多环境因素的影响，需要继续试验探索。
3.5谨慎使用麻醉药物解决抓捕难题
“台湾泥鳅”个体大，体表黏液多，难以抓住。可采用的麻醉药物较多，如MS-222、喹哪啶、三溴乙醇、可卡因、盐酸丁卡因等，它们虽都是麻醉品，但不易购买。有人在每升水中加0.1 g的MS-222或2%的丁卡因溶液中实施麻醉。乙醚药品易得、操作方便、复苏时间短。笔者在实验中曾经利用乙醚做注射前麻醉实验，乙醚麻醉实验中选择6个梯度，在水温24～25 ℃时，在每2 000 mL 水中加乙醚15 mL，“台湾泥鳅”麻醉和苏醒时间比较适当 ，所以笔者认为在人工催产注射时，乙醚的麻醉浓度选择可以在0.15%附近。但乙醚气味难闻，严重影响操作者的眼睛。在人工繁殖过程中，使用麻醉药物对“台湾泥鳅”繁殖影响目前尚不清楚，所以笔者认为在人工繁殖过程中，对麻醉药物的使用需谨慎。
教育期刊网 http://www.jyqkw.com
参考文献：
[1]
董聿茂，诸葛阳，黄美华，等.淡水鱼类.浙江动物志[M].杭州：浙江科学技术出版社，1991：146-147
[2] 孙国庆，申小苒，吴丽华.池塘泥鳅的人工繁殖及苗种培育技术[J].河南水产，2006（4）：10-11
[3] 何杰，郭桐，刘汉勤.泥鳅秋季人工繁殖及苗种培育试验[J].水产科技情报，2005，32(2)：73-75
[4] 孙守旗，唐复兴，孙棠丽，等.苗种扩繁技术[J].水产养殖，2009(3)：25-27
[5] 王坤，凌去非，李倩，等.苏州地区泥鳅和大鳞副泥鳅年龄与生长的比较研究[J].上海海洋大学学报，2009，18(5)：553-558
[6] 李倩，胡廷尖，王雨辰，等.泥鳅早期形态发育的研究[J].中国农学通报, 2012(07) ：132-138
[7] 胡廷尖，李倩，王雨辰，等.泥鳅规模化人工繁殖与苗种培育技术[J].科学养鱼, 2010 (10) ：6-7
[8] 胡廷尖，李倩，王雨辰，等.泥鳅激素浸泡催产试验的研究[J].中国农学通报, 2012(08) ：82-86
[9] 胡廷尖，李倩，王雨辰，等.泥鳅规模化人工催产与孵化的研究[J]. 浙江海洋学院学报(自然科学版), 2012, (01) ：12-17
[10] 刘士力，胡廷尖，李倩，等.泥鳅雌雄性比对繁殖影响的试验[J].河北渔业,2010 (12)：33-34
[11] 胡廷尖，李倩，王雨辰，等.泥鳅规模化人工繁殖和苗种培育技术操作规范[J].河北渔业,2011(08)：34-35
[12] 胡廷尖，李倩，王雨辰，等.真泥鳅和大鳞副泥鳅怀卵量的比较分析[J].湖北农业科学, 2012(13)：2794-2796
（收稿日期：2014-06-04；修回日期：2014-06-19）