李泳宁1，朱宏阳1，吴焜2，连建芸2
（1.福建卫生职业技术学院，福建 福州，350101；2.福建新闽科生物科技开发有限公司，福建 福州，350008）
摘要：以鲫鱼苗为研究对象，考察复合微生态制剂对鲫鱼苗生长的影响和对养殖水体的净化作用。将复合微生态制剂以不同添加量加入各实验水箱中，测定养殖过程中氨氮、亚硝酸盐、COD和硫化物的含量，并计算最终的存活率和平均增重。结果表明，复合微生态制剂最佳添加量为5～10 mg/L，能有效降低养殖水体中的氨氮、亚硝酸盐、COD和硫化物的含量。说明本复合微生态制剂有助于提高鲫鱼苗的生长性能，同时可对养殖水体起到较好的净化作用。
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关键词 ：微生态制剂；鲫鱼苗；生长性能；净化水体
中图分类号：S963. 73文献标识码：A
近年来，随着水产养殖的快速发展和集约化程度的提高，养殖水体中排泄物、有害藻类及病原菌大量繁殖，使养殖生态环境遭到严重破坏。此外，在水产养殖中抗生素的大量使用也严重损害了水产动物的健康，导致了动物中的药物残留和水体环境的生态失衡等问题[1]。因此，如何减少水体污染是水产养殖生产中迫切需要解决的问题。
微生态制剂作为一种绿色、环保的饲料添加剂，在调节动物机体微生态平衡、预防疾病、提高饲料转化率和保护生态环境等方面有着其他添加剂不可替代的作用[2-3]。目前微生态制剂在国内的畜禽和水产养殖中得到了广泛的应用[4-6]。特别在水产养殖中，微生态制剂能快速降低水体中有机物，有效减少氨氮、亚硝酸盐等有害化学物质的产生，从根本上改善水体环境，并且有助于提高水生动物的存活率和生产效率，降低饵料系数，增强机体免疫力和减少疾病的发生率[7-8]。
本实验采用一种由多种益生菌在固态基质上发酵后制备的新型复合微生态制剂，该制剂中含有地衣芽孢杆菌、酵母菌与嗜酸乳杆菌及其代谢产物，本实验考察了其对鲫鱼苗的生长性能和对养殖水体中氨氮、亚硝酸盐、化学需氧量(COD)和硫化物含量的影响。
1材料与方法
1.1材料
复合微生态制剂，本实验室制备，产品主要成分（每克含量）：地衣芽孢杆菌2.0×109，酵母菌1.5×108，嗜酸乳杆菌1.2×107，乳酸含量2.1%。
1.2试验动物分组与管理
选择体长为（5.0±0.5） cm的鲫鱼苗300尾，平均分成5组，每组3个平行，试验鱼置于室内玻璃水箱（100 cm×50 cm×50 cm）中，每箱放养20尾，水源采用水产养殖池塘养殖用水。实验组1～4为复合微生态制剂添加组，添加量分别为：1、2.5、5、10 mg/L。试验用气泵增氧，饲养周期为28 d，每天投喂2次，时间为8:00和16:00，温度控制在20 ℃左右。
1.3样品采集和水体分析
每周取养殖水体进行分析检测：氨氮的检测采用奈氏试剂比色法，亚硝酸盐的测定采用对氨基苯磺酸及α-萘胺比色法，COD测定采用高锰酸钾法，硫化物的测定采用碘量法。试验结束时，统计所有鱼数量，计算存活率；并从每箱随机取10尾鱼进行称重，并用生物统计方法处理数据。
2结果
2.1复合微生物制剂添加量对养殖水体中氨氮的影响
水体中的氨氮主要来源于水生动植物尸体及排泄物和剩余饵料的积累及腐败，氨氮主要侵袭粘膜，特别是鱼鳃表皮和肠黏膜，其次是神经系统，使鱼类等水生动物的肝肾系统遭受破坏[9]。本实验每周取水，测定在养殖水体中的氨氮含量变化，结果如图1所示。
对养殖水体中氨氮的影响
从图1可以看出，对照组和实验组1、实验组2养殖水体中的氨氮含量都随着养殖时间的延长都有所上升，饲养到28 d时，对照组水体中的氨氮值比初始增加了44.89%，实验组1比初始增加了25.95%，实验组2比初始增加了5.49%(与对照组比较，P＜0.05，差异显著)，但其氨氮含量的增幅低于对照组。而当添加量为5～10 mg/L时，水体中的氨氮含量则随着养殖时间的延长而逐渐下降，当饲养28 d后，实验组3和实验组4水体中的氨氮含量均低于初始值，分别降低了19.32%和20.08% (与对照组比较P＜0.01，差异非常显著)，可见复合微生态制剂的添加量为5～10 mg/L时，可较好地对水体中的氨氮起到降解作用。
2.2复合微生物制剂添加量对养殖水体中亚硝酸盐的影响
水体中低浓度的亚硝酸盐就能使鱼类中毒，鱼类容易形成类似缺氧症状。这主要是由于亚硝酸盐能促使血液中的血红蛋白转化为高铁血红蛋白，高铁血红蛋白不能与氧结合，从而造成血液输送氧能力的下降[8]。每周取水测定在养殖过程中水体中亚硝酸盐含量的变化，结果如图2所示。
水体中亚硝酸盐含量的影响
从图2中可以看出，对照组和实验组1的养殖水体中的亚硝酸盐含量都随着时间的延长而增加，其中对照组和实验组1的亚硝酸盐含量分别比初始增加了78.12%和48.96%(P＜0.05，差异显著)。而当复合微生态制剂添加量在2.5 mg/L以上时，养殖水体中的亚硝酸盐含量则随着养殖时间的延长明显降低，其中添加10 mg/L复合微生态制剂的实验组4效果最好，降低了38.54%(实验组2、3、4与对照池比较，P＜0.01，差异非常显著)。由此可见，本复合微生态制剂对水体中的亚硝酸盐的降解能力较强，能有效地降低水体中的亚硝酸盐含量，当复合微生态制剂添加量为2.5～10 mg/L时可获得较好的效果。
2.3复合微生物制剂添加量对养殖水体中COD 含量的影响
COD是表示水体中还原性物质量的指标，COD值越大，表示水体受污染越严重，COD的超标会使病原微生物种类和数量上升，从而造成水产养殖病害发生。本实验采用高锰酸钾法测定了养殖过程中水体的COD值，结果如图3所示。
水体中COD含量的影响
从图3可以看出，对照组和实验组1水体中的COD含量随着养殖天数的增加而显著增加，养殖到28 d后，COD含量分别8.21 mg/L和7?82 mg/L；而当复合微生态制剂添加量2.5～10 mg/L时均能降低水体中COD含量，虽然实验组2在养殖20 d后期水体中的COD含量有上升，但仍比对照组降低了35.36%；而实验组3和4则能显著降低COD含量，分别比初始降低了14?20%和28.52%，也分别比对照组降低了59?76%和67.03%(P＜0.01，差异非常显著)。可见，当复合微生态制剂的含量在5～10 mg/L时能有效地降低COD的含量。
2.4复合微生物制剂添加量对养殖水体中硫化物含量的影响
硫化物是水质恶化最重要的污染指标之一，硫化物是高密度、大量投饵的掠夺性养殖破坏水体生态平衡和弱化水体自净能力的产物[10]，本实验考察了复合微生态制剂对养殖过程中水体中硫化物含量的变化，结果如图4所示。
养殖水体中硫化物含量的影响
从图4中可以看出，在对照组的养殖水体中，硫化物的含量随着养殖时间的增加而显著提高，当养殖28 d时，水体中的硫化物达到0.42 mg/L，比初始提高了31.25%。而添加了复合微生态制剂的实验组，水体中的硫化物均比初始有显著降低，当添加量为1 mg/L时，养殖后期水体中的硫化物略有上升，但仍比对照组分别降低了43?2%；当添加为2.5～10 mg/L时，则随着养殖过程而逐渐降低，当养殖到28 d时，比初始降低了56.25%～61.46%(各组与对照组相比，P＜0?01，差异非常显著)。可见，添加剂当复合微生态制添加量为2.5～10 mg/L时能有效地去除水体中的硫化物。
2.5复合微生态制剂对鲫鱼苗饲养生长性能的影响
试验结束时，统计各养殖水箱中所有鱼数量，计算存活率；并从每箱随机取10尾鱼进行称重，结果如下表所示。
从表1中可以看出，添加复合微生态制剂实验组的鱼苗存活率均比对照组提高，当添加量高于5 mg/L时，均未有鱼苗死亡。从平均重量上来看，随着微生态制剂添加量的增加，鱼苗的平均重量均比对照组提高，当添加量为10 mg/L时，比对照组提高了3.25%(P＜0.05，差异显著)。可见，添加复合微生态制剂加有助于提高鱼苗的存活率和生长性能，当复合微生态制剂添加量为5～10 mg/L时可获得较好的效果。
3讨论
近年来，随着对微生态学和动物营养组学的深入研究，使人们逐渐认识到，以活性菌体为主的复合微生态制剂以其对提高水生动物生产性能、提高饵料利用率、提高存活率、对养殖水体的净化作用，以及无污染、无残留、安全可靠的优越性愈来愈受到重视。
目前，微生态制剂已经广泛应用于各种水产养殖中，取得了良好的社会效益和经济效益。常用的微生态制剂主要由光合细菌、芽孢杆菌、乳酸菌和酵母菌等一种或者几种组合在一起，而单一一类菌只能对水体的某一指标有较好的改善作用，王彦波等研究中以鲫鱼为对象，单独添加光合细菌能有效地降解水体中氨氮含量，而单独添加芽孢杆菌可以显著同化水体中的亚硝酸盐，而二者的复合制剂无论降低氨氮、亚硝酸盐还是COD均优于单独制剂[8]。温茹淑等将1%由光合细菌、芽孢杆菌、酵母菌与乳酸杆菌等组成的复合微生物制剂投喂草鱼，结果表明能有效促进草鱼的生长与提高消化能力[11]。本实验采用的复合微生态制剂主要是用地衣芽孢杆菌、酵母菌和嗜酸乳杆菌接种于固态基质发酵成生的一种新型复合微生态制剂，虽然未加入光合细菌，但其发酵产品中不仅含有活性菌体，而且含有大量微生物发酵代谢产物，在鲫鱼苗的饲养中能够提高鱼苗的存活率和生长性能，并能有效地降低水体中的氨氮、亚硝酸盐、COD和硫化物的含量，具有较好的应用价值。
4结论
本实验以鲫鱼苗为研究对象，考察了复合微生态制剂对鲫鱼苗生长的影响和对养殖水体的净化作用。实验结果表明，复合微生态制剂最佳添加量为5～10 mg/L，当添加量为10 mg/L时，平均重量比对照组提高了3.25%，水体中的氨氮、亚硝酸盐、COD和硫化物的含量分别下降了20?08%、38.54%、28.52%和61.46%，对养殖水体起到较好的净化作用。
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Application of a probiotics complex
on the culture of Crucian Carp
LI Yongning1, ZHU Hongyang1, WU Kun2, LIAN Jianyun2
(1.Fujian Health College，Fuzhou，Fujian 350101，China;2.Fujian Xinminke Biology
Science and Technology Development Co., Ltd, Fuzhou, Fujian 350008, China)
Abstract： In the study, the effects on crucian fry growth and water purification of microbial ecological agents were researched. Different concentrations microbial ecological agents feeding trials were conducted to estimate the content changes of ammonia nitrogen, nitrite, COD and sulfide. The survival and weight gains were also measured. The results show that , Compared with the control group, the content changes of ammonia nitrogen, nitrite, COD and sulfide were significantly decreased in microbial ecological agents feeding groups with the optimal level of 5～10 mg/L. The microbial ecological agents in the study were helpful to improve growth performance of crucian fry and efficiently purify aquatic water.
Key words：probiotics; Crucian Carp; growth performance; water purification
（收稿日期：2014-12-18）