论文网
首页 医学护理基础医学正文

2013年咸阳市健康人群脑膜炎奈瑟菌带菌率监测研究

  • 投稿丑小
  • 更新时间2015-10-29
  • 阅读量340次
  • 评分4
  • 47
  • 0

李凤英 刘军礼 刘美宁 马 波 罗文瑞 马 婷 邹利媛

咸阳市疾病预防控制中心免疫规划科 陕西省咸阳市 712046

【摘 要】目的:了解2013 年咸阳市健康人群脑膜炎奈瑟菌带菌率状况。方法:采用生化试验、氧化酶试验、PCR 试验等方法,检测咸阳市200 例健康人群血样,分析脑膜炎奈瑟菌阳性情况。结果:经细菌培养,奈瑟菌共检出6 例,我市健康人群奈瑟菌带菌率为3.00%;经定性PCR 实验对6 例带菌者中有2 例为阳性片段,其中1 例为C 群,1 例为B 群。结论:我市强化免疫接种措施取得显著成效,但应继续开展带菌率监测,进一步控制流行性脑膜炎的发病率,保护广大居民的身体健康。

教育期刊网 http://www.jyqkw.com
关键词 脑膜炎奈瑟菌;带菌率;监测

自咸阳市实施扩大免疫规划程序以来,流行性脑膜炎在我市的发病率呈明显的下降趋势[1]。近年来,我市流行性脑膜炎发病率均保持在1/10 万以下。为了解咸阳市健康人群脑膜炎奈瑟菌(Nm)带菌状况,制定更有效的流脑防治措施及策略,咸阳市疾病预防控制中心于2013 年8 月开展了咸阳市健康人群脑膜炎奈瑟菌带菌率监测,现将结果总结报告如下:

1 研究对象及方法

1.1 研究对象

根据过去3 年流脑平均发病水平、人口、地理分布特点等因素,选择泾阳、三原县为监测点,每个监测点分5 个年龄组(3 ~ 4 岁、5 ~ 6 岁、7 ~ 14 岁、15 ~ 19 岁、≥ 20 岁年龄组)进行健康人群带菌率监测。每个监测点每年龄段严格按照随机原则抽取20 人,本次共监测200人。

1.2 标本采集

依据WS259-2008 脑膜炎奈瑟菌实验室检测方法采集研究对象的咽拭子标本,并对样本进行统一编号。

1.3 检测方法及判定标准

1.3.1 检测方法

用无菌长柄棉签采集其咽后壁两侧分泌物,立即接种于卵黄双抗培养基,采集完后尽快将已接种的培养基送到实验室,37℃、5%CO2 培养24h 挑取疑似菌落进行分纯,然后做生化试验,染色镜检,氧化酶试验,血清学鉴定。

1.3.2 PCR 检测

主要仪器、设备:博日定性PCR 仪、SLAN96P、定性PCR 反应试剂由之江公司提供。反应参数:94℃,3min;40×(94℃,20s;TM ℃,20s;72 ℃,30s;)72 ℃,10min。

1.3.3 脑膜炎奈瑟菌判定标准

菌落典型,镜下为革兰阴性双球菌;盐水无自凝现象,氧化酶试验阳性;普通琼脂平板上不生长;生化试验:葡萄糖+麦芽糖+ 蔗糖- 乳糖- 果糖-;血清学试验:应与分群血清凝集。

1.4 数据处理

应用SPSS16.0 和SAS9.2 对所得资料进行统计处理,检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 咸阳市健康人群奈瑟菌带菌率状况经细菌培养,本次监测结果显示:经细菌培养,奈瑟菌共检出6 例,我市健康人群奈瑟菌带菌率为3.00%,该6 例病例基本资料如下:男性4 例,女性2 例;年龄:8 ~ 28(4.22±6.51)岁;泾阳县4 例,三原县2 例;4 例具有A 群流脑免疫史,3 例具有A 群+C 群流脑免疫史;6 例奈瑟菌带菌者均来自农村。

2.2 定性引物扩增电泳结果

采用定性PCR 实验对6 例带菌者血样进一步确定种群。由定性引物扩增电泳结果图可见,6 例标本中,扩增出2 个阳性片段,将这2 个阳性片段送测,结果显示2 例阳性结果中,其中1 例为C 群(引物:YF-siaD-C-3R),另1 例为B 群(引物:YF-siaD-B-2R)。

2.3 奈瑟菌DNA 测序结果

样本测序结果与数据库各血清群序列比对结果如下,划红线序列为样本。第一份样本DNA 碱基序列与目的基因(BAY234192.1)完全重合,第二份样本DNA碱基序列与目的基因(C-HM037270.1)完全重合,结果与PCR 结果一致。

3 讨论

我市2013 年健康人群脑膜炎奈瑟菌率监测,首次采用了“细菌培养-PCR 实验检测-DNA 测序”的监测技术及程序。细菌培养方法较为传统,在一定程度上假阳性率高,无法确定细菌亚群。PCR 实验可弥补细菌培养的不足,同时能够对细菌进行准确的分型定性。再此基础上采用DNA测序,可以进一步印证PCR 实验的准确性,在碱基片段的识别基础上,准确定位细菌种类、亚群等。本次经细菌培养检出6 例脑膜炎奈瑟菌带菌阳性者,采用PCR 实验及DNA 测序,确定2 例为脑膜炎奈瑟菌,其中B 群1 例,C 群1 例。提示:咸阳市应继续加强A+C 群流脑疫苗的查漏补种、强化免疫等工作;同时开展带菌率监测,若条件允许,应开展A 群、B 群流脑疫苗的免疫接种工作,对散居儿童、流动人口等高危人群优先开展此项工作,进一步降低我市健康人群脑膜炎奈瑟菌带菌率,控制流行性脑膜炎的发病率,保护广大居民的身体健康。

教育期刊网 http://www.jyqkw.com
参考文献

[1] 刘美真, 管大伟, 邓小玲等. 广东省首例W135 群流脑的病原学分析[J].华南预防医学,2008,34(3):26-28.

[2] 田晓辉, 夏昕, 王敏等. 张家界市首例C 群流脑死亡病例及其密接人群中分离的脑膜炎奈瑟菌实验室分析和PFGE 分型[J]. 实用预防医学,2012,19(9):1311-1295.

作者简介

李凤英(1983-),女,山东省济宁市人。大学本科学历。现供职于咸阳市疾病预防控制中心免疫规划科,主要从事常见传染病的预防、控制、监测工作。