李 杪
沈阳市儿童医院内科，辽宁沈阳 110032
[摘要] 目的 探讨特发性血小板减少性紫癜(ITP) 患者患病时PAIg的表达评价其在ITP中的临床意义。方法 选取40例ITP患儿作为研究对象，同期门诊体检正常儿童20例为对照组，应用酶联免疫吸附法（ELISA法）测定血小板相关抗体(PAIgA、PAIgG)、采取单克隆抗体特异性俘获血小板抗原（MAIPA法）测定血小板特异性抗体抗血小板膜糖蛋白抗体（GPIIb/IIIa、GPIb/IX），全自动血液分析仪测定血小板计数。结果 PAIgA、PAIgG、GPIIb/IIIa、GPIb/IX、血小板计数对照组分别为（4.22±0.78）ng/107PA、（23.17±3.46）ng/107PA、（0.33±0.01）A值、（0.31±0.01）A值、（137.82±42.37）×109/L，ITP组分别为（45.58±5.32）ng/107PA、（243.34±12.21）ng/107PA、（0.42±0.06）A值、（0.41±0.05）A值、（35.50±21.35）×109/L，两组以上各项指标之间比较均差异有统计学意义（P<0.05）；ITP组血小板计数与特异性抗体GPIIb/IIIa、GPIb/IX之间具有负相关，相关系数分别为-0.24（P<0.05）、-0.31（P<0.05）。结论 在ITP患儿中血小板相关抗体及特异性抗体均有明显升高，呈现阳性表达，ELISA法、MAIPA法联合检测有助于鉴别免疫性与非免疫性血小板减少型紫癜，能提高早期诊断率，并且有助于指导临床治疗。
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关键词 血小板减少性紫癜；抗体；血小板糖蛋白
[中图分类号] R558.2 [文献标识码] A [文章编号] 1674-074２（２０１4）09（a）－０032-02
[作者简介] 李杪（1981.10-），女，辽宁铁岭人，本科，主治医师，研究方向:儿内科。
特发性血小板减少性紫癜(idiopathicthrombocytopenicpurpura，ITP)是血小板减少性紫癜中的一种，也是一种常见的自身免疫性疾病，年发病率40~60/100万，主要以皮肤黏膜或内脏出血、血小板减少、骨髓巨噬细胞成熟障碍、血小板生存时间缩短及抗血小板自身抗体出现及自身抗体介导的破坏性血小板(platelet,PLT)减少为特征[1]。临床研究发现部分ITP患者体内可检测到特异性抗血小板相关抗体(plateletassociatedimmunoglobulin，PAIg)，提示PAIg与特发性血小板减少性紫癜之间具有密切相关[2,3]，为了解ITP患者患病时PAIg的表达及其临床意义，该院对2012年1—6月期间该院及周边医院诊治的ITP患者PAIg进行了测定，评价其在ITP中的临床意义，现报道如下。
1资料与方法
1.1一般资料
选取该院门诊及住院ITP患儿40例，包括急性型及慢性型各20例，均为初诊患者，在近期未接受过免疫抑制剂及糖皮质激素治疗，其中男14例，女26例，年龄4~18岁，平均（8.27±3.12）岁。ITP诊断标准依据中华医学会儿科分会血液学组推荐的《特发性血小板减少性紫癜诊疗建议（修订草案）》中的诊断标准进行诊断[4]。选取同期本院门诊进行体检性别及年龄相匹配体检无异常儿童20例作为对照人群（对照组），其中男5例，女15例，年龄5~18岁，平均（9.01±2.76）岁。
1.1.1仪器及试剂所有仪器为TECAN酶标仪，533JZK139508全自动血液分析仪，上海太阳生物技术有限公司生产的血小板抗体检测试剂盒。
1.1.2方法抽取空腹静脉血1mL,分离血清后置-70℃冰箱存储备用。PAIg(PAIgA、PAIgG)采取酶联免疫吸附法（ELTSA法）测定，测定方法按照试剂盒操作说明书进行操作，参考值PAIgA＜20ng/107PA，PAIgG＜108ng/107PA。血小板特异性抗体抗血小板膜糖蛋白抗体（GPIIb/IIIa、GPIb/IX）采取单克隆抗体特异性俘获血小板抗原（MAIPA法）测定，血小板计数使用全自动血液分析仪直接测定。
1.2统计方法
全部资料经SPSS12.0软件进行统计学分析，结果以均数±标准差（x±s）表示，组间比较采用t检验，方差分析，各临床参数之间的相关性研究采用多元线性回归分析法。
2结果
2.1血小板相关抗体、特异性抗体的表达及血小板计数
血小板相关抗体PAIgA、PAIgG、特异性抗体GPIIb/IIIa、GPIb/IX、血小板计数对照组分别为（4.22±0.78）ng/107PA、（23.17±3.46）ng/107PA、（0.33±0.01）A值、（0.31±0.01）A值、（137.82±42.37）×109/L，ITP组分别为（45.58±5.32）ng/107PA、（243.34±12.21）ng/107PA、（0.42±0.06）A值、（0.41±0.05）A值、（35.50±21.35）×109/L，两组以上各项指标之间比较差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。
2.2相关结果分析
ITP组血小板计数与特异性抗体GPIIb/IIIa、GPIb/IX进行相关性分析，结果显示血小板计数与特异性抗体GPIIb/IIIa、GPIb/IX之间具有负相关，相关系数分别为-0.24（P<0.05）、-0.31（P<0.05）。
3讨论
ITP作为免疫性疾病，其与自身血小板抗体的产生密切相关，在50年前Harrington就已经研究分析ITP患者存在抗血小板膜抗体的存在。血小板表明存在多种抗原，因此抗体也表现较为复杂，一般来说包括血小板相关抗原及特异性抗原两大类，因此抗体也主要有相关性抗体及特异性抗体，其中相关性抗体主要为PAIgA、PAIgG、PAIgM，特异性抗体主要有GPIIb/IIIa、GPIb/IX、IV、V等，目前临床上对ITP患者进行血小板抗体的检测研究较多，各种检测方法均有一定优势[5-6]。为了探讨血小板抗体在ITP中的表达，该院进行了相关研究。
血小板抗体多数是依赖于辅助性T淋巴细胞的B淋巴细胞产生，其辅助性T淋巴细胞对血小板是否产生抗体起到关键作用，其还能对抑制性T淋巴细胞网络和抑制性细胞因子进行调控。血小板抗体可通过其Fab端与血小板膜糖蛋白或巨噬细胞相结合，并且激活单核细胞-巨噬细胞系统影响血小板破坏[7]。有学者试验研究发现儿童ITP患者血浆中巨核细胞增多，并且存在血小板抗体及血小板功能抑制，而正常对照组无此种现象存在[8]。该院采用ELTSA法、MAIPA法分别测定了ITP患者及正常对照组血小板抗体，结果发现ITP患者其血小板相关抗体PAIgA、PAIgG及特异性抗体GPIIb/IIIa、GPIb/IX均明显较对照组升高，血小板计数明显减少，对照组检测结果在正常范围内，提示ITP患者血小板相关抗体及特异性抗体均有阳性表达。临床上研究认为ELTSA法测定血小板抗体虽然灵敏性高但是特异性较低，虽然能测定出血小板机体总量，但是无法确定是免疫性还是非免疫性因素导致，并且在测定结果容易受到年龄、循环免疫复合物等因素的影响导致测定结果误差值较大，因此临床上更多学者倾向于测定特异性抗体GPIIb/IIIa、GPIb/IX等的表达[9]。目前对于特异性抗体GPIIb/IIIa、GPIb/IX的检测方法以MAIPA法最为常用，并且相对是临床上最先进和特异性最高、灵敏度高的检测方法，能对血小板上微量的抗原也能进行检测，临床研究发现其特异性抗原高达97%，阳性预测值在96%[10]，因此使用MAIPA法检测血小板特异性抗体具有很高的临床价值。而该院采取了ELTSA法、MAIPA法两种方法进行了血小板相关抗体及特异性抗体检测，均发现血小板抗体在ITP患儿中有异常表达，ITP组血小板计数与特异性抗体GPIIb/IIIa、GPIb/IX进行相关性分析显示具有负相关，进一步说明血小板计数与病情严重程度、特异性血小板抗体密切相关。
该研究结果显示，在ITP患儿中血小板相关抗体及特异性抗体均有明显升高，呈现阳性表达，并且联合检测有助于鉴别免疫性与非免疫性血小板减少型紫癜，能提高早期诊断率，并且有助于指导临床治疗。
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（收稿日期：2014-06-03）