李淑平
山西省灵石县计划生育妇幼保健服务中心，山西灵石031300
【摘要】目的：对阴道细菌多种检验方法进行比较。方法：对147例初步确诊为细菌性阴道炎的患者分别采用细菌培养法、革兰染色、PCR检测法等三种方法进行阴道细菌检验，观察三种方法的阴道细菌检出情况。结果：该三种检验方法所对应的检出率分别为77 6%、36 7%、72 8%。结论：建议医院在进行阴道细菌的检验方面，应结合自身实际条件，灵活选用细菌培养法或PCR检验法。
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关键词 阴道细菌；细菌培养法；PCR检验法
【中图分类号】R446 5【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517(2015)01-0110-01
细菌性阴道疾病为成年女性中常见的妇科疾病之一，其长期以来一直都对女性的身体健康产生着不同程度的影响。如何快速而准确地对阴道细菌进行检测向来是妇科医疗工作者关注的焦点问题。笔者于近期针对本科收治的女性患者分别采用不同方法进行检验，旨在比较分析出更具临床应用价值的检验方法，现报道如下。
1资料与方法
1 1一般资料选择我院妇科门诊于2013年9月至2014年2月期间收治的147例初步确诊为细菌性阴道炎的患者作为研究对象，所有患者均知情同意，同时均排除正处于月经期或妊娠期者、近2日内有过性生活者以及近期有阴道局部用药者。年龄18~57岁，平均（32 7±9 8）岁；细菌性阴道炎病程2个月至3年，平均病程（10 3±6 4）个月；已婚96例，未婚51例；有性生活史者114例，占到总体入选病例的77 5%。将147例患者按门诊就诊顺序随机分为A、B、C三组，分组后组间两两比较,三组患者年龄、病程、婚姻状况、性生活史等一般资料差异均无统计学意义（P>0 05），具可比性。
1 2方法
1 2 1阴道分泌物采集用医用棉签插入患者阴道内，轻轻旋转以沾取阴道分泌物，之后再将棉签置于装有2ml生理盐水的试管中待检。
1 2 1A组检验方法采用细菌培养法，具体方法为：将生理盐水中的样本在无菌条件下接种到专用细菌分离的培养基，在35℃条件下二氧化碳培养箱中培养48h，最后选择其中呈半透明、灰色、光滑的水滴形状菌落按生化标准进行生化检验即可。
1 2 2B组检验方法采用革兰染色法，具体方法为：将无破损的清洁玻片在95%乙醇中浸泡一定时间后取出晾干备用，接着摄取样本进行涂片，进行革兰染色后再进行显微镜检。
1 2 3C组检验方法采用PCR检测法，具体方法为：将500μl阴道分泌物放置于生理盐水中进行离心处理10min，转速为12000r/min，去除上清液，加入适量裂解液并在98℃条件下加热10min，离心5min，转速同前。取上清液制成DNA模板。在采用PCR检测细菌阳性或阴性比较中，尤其是在阴道分泌物DNA制作的时候需注意：应使用相同的PCR试剂，同时将其中一个未添加DNA的作为阴性组，添加有DNA模板的PCR扩增为阳性组，再对阳性组与阴性组进行对比分析，检查PCR产物及其扩增情况。取25μl的缓冲液、引物、模板、无菌离子水，采用无菌的30μl石蜡油覆盖在上面，进入PCR循环阶段，共循环32个循环。
1 3统计学方法本研究所得数据的统计学处理采用SPSS 17 0统计分析，计量资料采用t检验，计数资料比较行χ2检验，以P＜0 05为差异有统计学意义。
2结果
在本次入选的147例患者当中，细菌培养法检出棒状杆菌15例，加特纳菌86例，肠球菌13例，共计114例，检出率为77 6%；革兰染色法检出棒状杆菌3例，加特纳菌49例，肠球菌2例，共计54例，检出率为36 7%；PCR检测法检出棒状杆菌14例，加特纳菌81例，肠球菌12例，共计107例，检出率为72 8%。检出率的组间比较结果显示，A组与C组比较差异无统计学意义（P>0 05）；A组与B组比较，差异有统计学意义（P<0 05）；C组与B组比较，差异有统计学意义（P<0 05），详见表1。
3讨论
虽然细菌培养向来被认为是临床检验与诊断细菌感染的金标准，但因其检验过程比较复杂，同时也相对更为费力，尤其在基层医院还比较难以开展。而革兰染色法因其简单易行，已经在临床上得到广泛应用，以至于在阴道细菌的检验方面，曾有不少学者认为应将其作为检验首选方法。然而，该方法由于难免受到多种因素的影响，在具体的检验过程中往往易发生较大的误差，比如染色过程中出现脱色不当等。以脱色过度为例，一旦发生此种情况，势必将导致在显微镜检的时候会误将革兰阳性细菌辨识为革兰阴性菌。PCR检验法是融合了光谱技术的精确定量、DNA杂交的特异性以及其敏感性，在对细菌进行检验过程中，与细菌培养法比较，差异无统计学意义（P＞0 05），但阳性检出率显著高于革兰染色法，差异有统计学意义（P<0 05）。综上所述，医院在进行阴道细菌的检验时，应结合自身实际条件，灵活选用细菌培养法或PCR检验法。
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参考文献
［1］ 彭碧华．不同临床检验方法在细菌性阴道病诊断中的比较分析［J］．中国医药指南，2011，9(32)：14-15．
［2］ 马芹，刘克平，叶香．细菌性阴道病阴道分泌物的检测方法及治疗方案分析［J］．中国妇幼保健，2008，23(18)：2543-2544．
(收稿日期：2014 06 11)