马智龙
云南省文山市人民医院，云南文山663000
【摘要】目的：探讨两种药敏试验方法对血液细菌检测的鉴定以及临床应用价值。方法：选择280份阳性血液标本进行常规药敏和直接药敏的检查方法，分析鉴定结果。结果：直接法对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌检测符合率同常规法比较差异无统计学意义（P＞0.05）；两种鉴定法药敏试验结果的检验敏感性比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：直接与常规药敏试验在临床血液细菌检验中检出符合率均较高，但是直接药敏试验操作简单、时间相对较短，有助于临床细菌感染的血液检测。
教育期刊网 http://www.jyqkw.com
关键词 直接药敏；常规药敏；血液细菌检验
【中图分类号】R446.11【文献标志码】A【文章编号】1007-8517(2015)03-0104-02
败血症和菌血症一直是临床上严重威胁患者生命安全的疾病，具有较高的病死率，因此快速准确的进行药敏试验与菌种的鉴定对有效开展临床治疗具有重要的意义［1］。近些年来随着抗菌药物的滥用造成了各种致病菌耐药性与敏感性的变迁，如何合理选择正确的细菌鉴定方法有助于提升对疾病诊断的准确率，药敏试验主要是通过血液样本中细菌对于抗菌药物的敏感度进行检测达到对细菌类型的鉴定，常用的方法有常规检验和直接药敏试验等［2-3］。笔者对比分析了直接药敏试验和常规检验在血液细菌检验中的应用效果，现报告如下。
1资料与方法
1.1研究对象选取2013年6月至2014年6月我院治疗的发热并全身感染患者300例，其中检测阳性样本280份，所有患者均采集血液标本，每人采血30ml，对样本进行冷藏保存送检验科检查。
1.2检测方法常规药敏试验：采集阳性血样在麦康凯平板、巧克力平板与血平板接种，16~22h后在温度35℃、6%二氧化碳孵育后进行革兰染色，得出结果后选择合适酶采用Walkaway系统进行药敏试验鉴定。
直接药敏试验：将样本放置BACTEC9240系统进行培养检测，阳性标本使用消毒注射器抽取10ml放入无菌试管分离细菌，以1600r/min离心，6min后收集上清液并以2900r/min离心，经13min后去除上清液，使用PBS洗涤，两次沉淀后进行重悬。将20μl悬液进行革兰染色并在显微镜下观察，药敏试验第一次使用MH+6%羊血平板进行，得出结果后选择适合酶将菌液浓度调为6.0×105cfu/L，接种至NC21综合板最后进行药敏试验与细菌鉴定。一般菌种则在MH平板上接种1~3滴悬液，使用无菌试纸涂抹均匀，然后将其贴到药敏纸片，采用2005NCCLS标准对敏感度、耐药性进行评判。
1.3统计学处理应用SPSSl5.0软件分析，计数资料采用百分比表示，数据对比采取χ2校验，P＜0.05为差异具有统计学意义。
2结果
2.1280份阳性标本不同鉴定法符合率比较300例患者中阳性标本280份，直接药敏试验检测革兰阳性菌与革兰阴性菌检验结果符合率为90.37%、86.02%，两者比较差异无统计学意义（P＞0.05），详见表1。
2.2两种鉴定方法药敏试验结果比较采用两种药敏试验方法对革兰阳性菌和阴性菌检验敏感度同常规试验法比较差异无统计学意义（P＞0.05），详见表2。
3讨论
近年来随着细菌耐药性的增加，败血症和菌血症等疾病逐渐增多，血液疾病患者病死率逐年提升，目前在国外抗生素已经被列为控制使用的药物，研究显示抗生素在快速治愈细菌感染的同时会提高该细菌抗药性，使用药物的频率决定了细菌耐药性的高低［4-5］。大量的临床试验证实一旦使用抗菌药物后有细菌存活，此细菌繁殖的后代具备一定抗药性，如果再次发生感染所使用抗生素药量低于前次用量治疗效果将不明显，而加大用量后细菌存活几率超出原始菌株，这也就大大增加了临床治疗的难度［6］。因此临床上治疗细菌引发疾病如何快速准确鉴定细菌种类成为治疗成败的关键，快速的得到检验结果可以减少患者等待时间，降低患者病情加重甚至死亡的几率。
传统的临床检测方法为常规药敏试验，通过定性方法进行试验，通过抑菌环的直径和抗菌药物抑菌的浓度负相关进行试验设计，但是条件要求较高，临床使用具有一定的局限，而且检测的时间相对较长，需要等待2~3d的时间，而在等待结果的时间只能凭借医师临床经验用药，治疗效果一般。我院对比了直接药敏法对血液标本的检测，该方法快速、高效，通过研究显示总符合率同常规法无明显差异，同时该方法的检测时间在10h左右，可以明显的缩短检测的时间，降低耗材的使用，操作步骤更简单，适合临床血液细菌的检测［7-8］。本研究显示，直接法在对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌检测符合率同常规法比较差异无统计学意义（P＞0.05）。两种鉴定法药敏试验结果的检验敏感性比较差异无统计学意义（P＞0.05）。
综上所述，直接与常规药敏试验在临床血液细菌检验中检出符合率均较高，但是直接药敏试验操作简单、时间相对较短，有助于临床细菌感染的血液检测。
教育期刊网 http://www.jyqkw.com
参考文献
［1］程向方，昌建明．支原体培养在治疗后复查不同分离培养时间与疗效分析［J］.中国误诊学杂志，2011，11(9)：32-33.
［2］张培，王卫文，夏永祥．医院葡萄球菌的临床分布及其耐药性分析［J］.国际检验医学杂志，2011，32(8)：68-69.
［3］李慧．两种细菌鉴定法在临床血液检验中的应用［J］.现代预防医学，2011，38(9)：641-642.
［4］陈欢欢，文怡，刘根，等．焰血培养阳性标本直接细菌鉴定和药敏中应用分离胶试管的方法探讨［J］.实用临床医药杂志，2011，15(15)：156-157．
［5］田月如，阮斐怡，刘红，等．革兰阴性菌引起的血培养阳性标本的直接鉴定药敏试验［J］.中华微生物学和免疫学杂志，2011，1(3)：220-224．
［6］张茂海．两种细菌鉴定法在临床血液检验中的应用研究［J］.湖南中医药大学学报，2011，31（12）：3-7.
［7］李祖新．临床血液检验中的两种不同细菌鉴定法应用分析［J］.中外医疗，2013，24（6）：185-186.
［8］欧志方．两种细菌鉴定法在临床血液检验中的应用分析［J］.当代医学，2013，2（3）：64-65.
(收稿日期：2014.11.11)