罗川 章文伟 谭秋生 罗舜 邓才富*
重庆市药物种植研究所，重庆南川408435
基金项目：重庆市科委基本科研业务费资助。
作者简介：罗川（1982-），男，重庆南川人，助理研究员，主要从事中药化学质量研究。
通信作者：邓才富，副研究员，E-mail：dcf0509@126.com
【摘要】目的：对重庆金佛山地区升麻、小升麻和南川升麻三种升麻的化学成分进行初步研究。方法：在三种升麻生物碱、皂苷、黄酮、有机酸存在判定基础上，分别测定四种大类的含量。结果：三种升麻的生物碱与有机酸的含量呈明显的负相关关系，金佛山地区三种升麻的生物碱、总皂苷和总黄酮含量分布一致，以南川升麻的含量最高。结论：研究结果可为南川升麻的保护性研究提供科学依据，对金佛山地区升麻药材的野生抚育栽培提供支持。
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关键词 升麻；小升麻；南川升麻；化学成分
【中图分类号】R284.1【文献标志码】A【文章编号】1007-8517(2015)03-0023-02
升麻属（Cimicifuga）植物为毛茛科（Ranunculaceae）多年生草本［1］，大多可作药用。升麻始载于《名医别录》，是一味常用中药。李时珍曰：“其叶似麻，其性上升，故名。”升麻性味甘、辛、微寒，入肺、脾、胃经。升麻具有清热解毒、升举阳气、发表透疹的功效，主治风热头痛、齿痛、咽喉痛、子宫脱垂等症［2］。药理研究表明，升麻属植物所含的异阿魏酸（IFA）和阿魏酸（FA）具有抗炎、解热、镇痛、抗溃疡、降压、镇静、解痉、抗惊厥、抑制核苷转运及抗病毒等作用［3-4］。其药理活性成分主要分布大类为生物碱类、皂苷类、黄酮类、有机酸类［5］。
重庆市金佛山为国家级自然保护区，是我国中亚热带常绿阔叶林森林生态系统保存最完好的地区之一，共有植物资源5000余种。有小升麻、短果升麻、升麻、南川升麻、单穗升麻等分布［6］，其中小升麻、升麻、南川升麻三个品种分布较为集中，在海拔1400~1800m区域相互交错。通过对金佛山几种升麻主要化学成分的研究，为以后进一步的研究工作打下基础。
1仪器与材料
1.1仪器梅特勒（上海）AL-104型分析天平；JA21002型上海越平电子天平；上海龙跃DHG-9623A型立式鼓风干燥器；北京兴时利和ZN-08中药粉碎机；上海摩尔MoLecuLar标准智能型纯水机；SmartTesterCP-401型酸度计；搅拌器；索氏提取器；抽滤器。
1.2材料药材采自重庆金佛山北坡地区，经项目组邓才富副研究员鉴定分别为升麻C.foetidaLinn、小升麻C.acerian(Sieb.EtZucc.)Tanaka和南川升麻C.nanchuanensisHsiao三种；所用试剂均为分析纯；水为现制纯水。
2方法与结果
2.1生物碱的测定
2.1.1生物碱存在判定碘化铋钾试验：取试样的稀酸水溶液1ml，加碘化铋钾试剂1~2滴，颜色为棕黄色至棕红色，属阳性反应；碘液试验：取样品水溶液1ml，加碘－碘化钾试剂1~2滴，生成沉淀为褐色或暗褐色，属阳性反应；雷氏铵盐试验：取试样的稀酸水溶液（pH3~4）1ml，加2%雷氏铵盐试剂，生成沉淀为黄红色，属阳性反应；苦味酸试验：取试样的中性水溶液，加苦味酸饱和水溶液一滴，生成沉淀为黄色，属阳性反应。
2.1.2生物碱含量测定取样品粉末50g，置于1000ml锥形瓶中，加入水约600ml，用20%盐酸调至pH为2，浸泡过夜，尼龙布过滤，得滤液，用浓氨水调pH至8~9，然后迅速用氯仿萃取得到氯仿液，无水硫酸钠干燥，回收氯仿至干，得总生物碱（油状物），同时做空白。
2.2有机酸的测定
2.2.1有机酸存在判定取粗粉5g，加10倍量水，回流提取2次，1h/次，过滤，合并提取滤液，取适量滤液，测其pH值，为弱酸性。
2.2.2有机酸含量测定分取样品20g两份，用索氏提取器，加10倍量95%甲醇，用水浴加热回流提取2次，5h/次；将提取液转移到500ml容量瓶中，用95%甲醇定容，用移液管准确吸取50ml提取液于锥形瓶中；用NaOH标准溶液进行滴定。同时做空白试验。
2.3皂甙的测定
2.3.1皂甙存在判定取药材粗粉5g，加10倍量水，回流提取2次，1h/次，过滤，合并提取滤液，振摇后生成的气泡在15min内不消失，属阳性反应。
2.3.2皂苷含量测定取两份样品各20g，先用石油醚脱脂；将水液倒入索氏提取器，加入95%乙醇200ml，水浴加热回流2次，5h/次；将提取液浓缩后加入丙酮，进行过滤（以100ml为量，反复多次加入，以不再产生沉淀为止）；干燥沉淀，称量得总皂苷。
2.4黄酮的测定
2.4.1黄酮存在判定取样品粗粉10g，加5倍95%乙醇及60%乙醇在水浴上分别回流2次，1h/次，过滤，合并提取滤液，（取滤液浓缩成浸膏）加少量1~2%盐酸溶液过滤，附在滤纸上的残渣以少量乙醇溶解，得乙醇液；取乙醇液适量置试管中，加少许镁粉振摇，再滴加几滴浓盐酸，水浴上加热1~2min，观察颜色有明显变化，属阳性反应；取乙醇液适量滴于滤纸上，与1%三氯化铝乙醇液纸斑反应后，置于紫外灯下观察，有明显荧光，属阳性反应。
2.4.2黄酮含量测定称取1.5g的石灰粉（CaO），置于干净的小研钵中，加入10ml水后研成乳液备用；将样品20g置于500ml烧杯中，加水300ml，在搅拌下加入上述制备的石灰乳，调节pH值至8~9，加热至微沸，维持pH值至30min，趁热抽滤；弃去滤渣，冷至60~70℃，用浓HCL调节pH至4~5，静置1h，析出粗制芦丁，抽滤，弃去滤液，收集粗制芦丁；将粗制芦丁悬浮于蒸馏水中，加热煮沸15min，然后趁热过滤，弃去不溶物，充分静置，过滤，收集芦丁结晶，在60~70℃条件下干燥，得精制芦丁。
2.5不同品种升麻的化学成分含量不同品种升麻四类化学成分差异较大。生物碱含量与有机酸呈明显的负相关关系，结果见表1。
3结论与讨论
研究对金佛山地区在海拔1400~1800m区域分布较为集中的升麻、小升麻和南川升麻三个品种的生物碱、有机酸、总皂苷和总黄酮含量进行了初步研究，从实验结果可以看出，除生物碱与有机酸的含量呈明显的负相关关系外，金佛山地区三种升麻的生物碱、总皂苷和总黄酮含量分布一致，都以南川升麻的含量最高，其中南川升麻的生物碱含量是小升麻的2.5倍左右，是升麻的4倍多，优势明显。
南川升麻为金佛山地区的特有种，只在金佛山北坡海拔1700m以上的地区有少量分布［7］。本研究的结果可以为南川升麻的保护性研究提供科学依据，同时对金佛山地区升麻药材的野生抚育栽培提供支持。
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参考文献
［1］中国科学院中国植物志编辑委员会．中国植物志（第27卷）［M］．北京：科学出版社，1979：93-103．
［2］潘瑞乐，陈迪华，斯建勇．升麻地上部分化学成分研究［J］．药学学报，2003，38(4)：272．
［3］国家药典委员会．中华人民共和国药典（一部）［M］．北京：中国医药科技出版社，2010：50．
［4］《全国中草药汇编》编写组．全国中草药汇编（上册）［M］．北京：人民卫生出版社，1979：220．
［5］刘颖，张小茜．升麻质量标准的研究［J］．中草药，2005，36(9)：1402-1404.
［6］刘正宇．重庆金佛山生物资源名录［M］．重庆：西南师范大学出版社，2007：70．
［7］罗川，邓才富，刘开阳，等．南川升麻化学成分的初步研究［J］．现代中药研究与实践，2010，24(5)：38-39．
(收稿日期：2014.10.27)