纪青 向耘
广东省珠海市第二人民医院皮肤科，广东珠海519020
【摘要】目的：分析珠海市甲真菌病病原菌的流行特点，了解其种类和构成情况，并合理控制流行蔓延。方法：选取临床拟诊断为甲真菌病并且真菌培养阳性的2184例患者临床资料进行分析，并进行真菌分离及菌种鉴定。结果：2184份标本中有1428份检出真菌菌丝或孢子，皮肤癣菌、酵母菌及霉菌三种病原菌比例分别为42.75%、45.54%和11、71%。TDO和DLSO患者以酵母菌感染为主，而PSO和SWO患者以皮肤癣菌感染为主。结论：珠海市甲真菌病的病原菌以酵母菌为主，临床上应根据甲真菌病患者病原菌的培养结果慎重合理选择抗真菌药物，从而提高甲真菌病的治疗效果。
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关键词 病原学；甲真菌病；流行病学
【中图分类号】R519【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2015）04-0106-02
作者简介：纪青（1966-），女，主任医师，研究方向：真菌、性病。
甲真菌病是一种传染性疾病，此疾病的发病原因主要为甲板或甲下组织受到真菌感染，最常见的真菌包括酵母菌、皮肤癣菌等［1］。据相关流行病学调查显示，目前全世界有超过3%的人群患有甲真菌病，并且皮肤真菌感染患者中30%为甲真菌病患者［2］。临床上发现甲真菌病的致病菌多种多样，经多名学者研究发现，南北差异对于甲真菌病的致病菌类型也有影响，潮热地区更容易生长酵母菌，而统计全国发病原因可知，以皮肤癣菌感染最为常见，其次是酵母菌、霉菌［3］。为了解珠海市甲真菌病的临床分类、菌种构成等情况，笔者分别采集2010年12月至2013年12月期间在珠海市第二人民医院皮肤科、珠海市金湾区三灶医院皮肤科等珠海市各医院皮肤科门诊就诊的怀疑甲真菌病患者，仔细询问患者的病史及一般资料，了解真菌类型，并进行鉴定。现将报告总结如下。
1资料与方法
1.1一般资料选取2010年12月至2013年12月期间分别在珠海市第二人民医院皮肤科、珠海市金湾区三灶医院皮肤科、中山大学附属第五医院皮肤科、遵义医学院第五附属（珠海）医院皮肤科门诊就诊的临床拟诊断为甲真菌病的患者2184例。其中男914例，女1270例，年龄1个月至84岁，平均年龄（38.1±18.5）岁，病程1个月至30年，平均病程（3.7±1.4）年。
1.2方法
1.2.1实验材料①20%KOH溶液；②含氯霉素沙保氏琼脂平皿培养基（广州市迪景微生物科技有限公司生产）；③含氯霉素、放线菌酮沙保氏琼脂平皿培养基；④玉米粉吐温和酵母培养基；⑤科玛嘉念珠菌显色培养基。
1.2.2标本采集分别刮取2184例患者的甲屑。标本采集过程中应注意对甲及甲周围皮肤的无菌处理，避免标本受到污染。首先采用75%酒精对甲及甲周围皮肤进行消毒，然后采用钝刃的手术刀在患甲处刮取少量甲屑。
1.2.3标本直接镜检将标本置于载玻片，后在标本上方滴加1滴20%KOH作为封固液。制片完成后，即可采用光学显微镜对标本进行观察。观察过程中查到孢子或菌丝即为真菌阳性。所有标本均做培养进行菌种鉴定。
1.2.4培养和菌种鉴定将标本分别多点接种于沙保氏琼脂平皿培养基，将平皿置于27℃恒温箱中培养4周，分别于第1、2、3、4周观察培养基内菌落生长情况，未观察到真菌生长即可视为阴性。若有真菌生长，通过对菌落形态外观、生长形态、特殊培养、小培养、生化反应和镜下特征进行菌种鉴定。念珠菌通过转种科玛嘉念珠菌显色培养基、或API20CAUX测试条鉴定。
1.3观察评价指标根据“医学真菌学-实验室检验指南”分析各菌种种类，若培养基中仅观察到皮肤癣菌生长，即可判定皮肤癣菌为病原菌；若未观察到皮肤癣菌，则培养基中相同菌落数超过4个，可将该真菌作为病原菌；若观察到培养基中同时有两种及两种以上菌落数超过4个的真菌生长，即可判断为混合感染。
1.4统计学方法采用SPSS18.0统计学软件进行统计学分析，统计确诊患者的性别、平均年龄等，以及真菌学检查阳性率、阴性率及病原菌菌种构成比率和分布情况。
2结果
2.1菌种及分布2184份标本中有1428份真菌培养阳性，阳性率为65.4%，其中男女患者比例为1.39∶1。共分离出1469株真菌，其中酵母菌699株（45.54%），皮肤癣菌628株（42.75%），霉菌172株（11.71%）。42例混合感染患者占所有真菌培养阳性患者的2.94%，分析混合感染的种类分别有以下几种组合，须癣毛癣菌+近平滑念珠菌4例，白念珠菌+近平滑念珠菌20例，近平滑念珠菌+青霉菌3例，混合热带念珠菌、近平滑念珠菌两种真菌的有4例，混合热带念珠菌、白念珠菌共有4例，白念珠菌+镰刀菌5例，白念珠菌+曲霉菌2例。各菌种分布情况见表1。
2.2各临床类型菌种构成各临床类型菌种构成见表2，由表可得，不同患者感染的真菌种类各不相同，当发现酵母菌感染时应主要怀疑TDO和DLSO患者，而发现皮肤癣菌感染时主要怀疑PSO和SWO患者。
3讨论
甲真菌病又称甲癣，俗称“灰指甲”，是指各真菌侵犯甲板或甲下导致甲感染所引起的疾病［4］。真菌感染以免疫功能低下及糖尿病等有基础疾病患者多见，近年来随着人民生活水平的提高，糖尿病患者逐渐增多。相关研究提示，酵母菌成为甲真菌病主要致病菌有可能与此有关［5-6］。20世纪80年代就有学者对甲真菌病进行流行病学研究，但由于研究方法不统一，多为回顾性总结，因此结果可比性较差［7］。
本次研究发现，皮肤癣菌、酵母菌及霉菌三种甲真菌病的病原菌比例分别为42.75%、45.54%和11、71%，而国内外相关研究显示，甲真菌病的主要致病菌为皮肤癣菌，而其次才是酵母菌和霉菌，与本次研究结果不符［8］。考虑造成此研究结果的可能因素为各地区存在气候条件和生活习惯的差异，可进一步与同纬度相似气候条件做进一步对比分析。并且不同临床类型患者的主要致病菌不同，本次研究中TDO和DLSO患者与PSO和SWO患者，分别以酵母菌和皮肤癣菌感染为主。
综上所述，珠海市甲真菌病的病原菌以酵母菌为主，临床上应根据甲真菌病患者病原菌的培养结果慎重合理选择抗真菌药物，从而提高甲真菌病的治疗效果。
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参考文献
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（收稿日期：2014.11.15）