李英1 唐英琪2
1. 辽宁省沈阳市第二中医医院，辽宁沈阳 110101；2.大连医科大学附属第一医院内分泌科，辽宁大连 116011
[摘要] 目的 分析并研究载脂蛋白E基因多态性与2型糖尿病血脂及其脑梗死并发症的关系。方法 从2012年5月—2014年5月期间该院收治的2型糖尿病患者中选取100例作为临床研究对象，设定为试验组，其中50例患者并发脑梗死，50例患者无并发症；同时从全市范围内征集100例健康者作为对照组。两组实验者均采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法检测其ApoE基因多态性，通过基因多样性的检结果分析并研究其与2型糖尿病血脂及其脑梗死并发症的关系。结果 对照组和试验组等位基因分布频率相差不大，差异无统计学意义(P＞0.05)；对试验组的100例患者进行组间比较发现，患者低密度脂蛋白与胆固醇含量在携带E4等位基因的患者中最高，在携带E2等位基因的患者中最低，差异有统计学意义(P＜0.05)。且实验结果显示并发脑梗死的患者E4等位基因的携带率高，无并发脑梗死的患者E4等位基因的携带率低，差异有统计学意义(P＜0.05)。结论 载脂蛋白基因多样性与2型糖尿病之间不存在必然的关系；2型糖尿病高脂血症及其并发脑梗死与E4等位基因的携带有关。
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关键词 载脂蛋白E基因多态性；2型糖尿病；血脂；脑梗死
[中图分类号] R743.33[文献标识码] A[文章编号] 1674-074２（２０１4）11（a）－０037-03
2型糖尿病具有明显的遗传倾向和家族群发现象，是一类与血浆脂蛋白代谢有关的基因疾病[1]。而载脂蛋白是构成血浆脂蛋白的重要成分，在血浆脂蛋白的代谢中发挥着极其重要的作用，因此载脂蛋白与2型糖尿病之间存在着密切的关系[2]。临床研究发现[3]2型糖尿病患者且并发脑梗死的患者往往表现为低密度脂蛋白和胆固醇水平的异常增高。在该研究中，对2型糖尿病载脂蛋白E基因多态性与其血脂及其脑梗死并发症的关系进行分析和研究，现分析2012年5月—2014年5月间该院收治的100例2型糖尿病患者的临床资料，报道如下。
1资料与方法
1.1一般资料
从该院收治的2型糖尿病患者中选取100例作为临床研究对象，设定为试验组，其中50例患者并发脑梗死，50例患者无并发症；同时从全市范围内征集100例健康者作为对照组。对照组100例，男性48例，女性52例；年龄21～86岁，平均（53.3±10.1）岁；对照组的100人经全身检查确定为健康者。试验组100例，男性55例，女性45例，年龄24～82岁，平均（53.8±10.2）岁；病程1～3年，平均（2.5±1.1）年。
1.2检测方法
首先采集标本：参加实验的200名受试者于清晨空腹状态下采集静脉血8 mL，其中的3 mL用于血脂检查，检测其低密度脂蛋白和胆固醇含量，其余5 mL加入抗凝剂后低温保存。随后提取DNA：应用酚-氯仿法从低温保存的静脉血液样品中提取DNA,立即放入冰箱中低温保存等待下步实验时再取出。然后扩增PCR：该反应在PCR扩增仪中进行，其中引物位于ApoE基因第四外显子内，包含了两个多态性位点，反应物包括适量模板DNA，dNTP，Mgcl2,Kcl,二甲亚砜及相应的反应酶等，随后循环进行变性，退火，延伸等过程直至得PCR产物。最后向PCR产物中加入内切酶得酶切产物行凝胶电泳后，染色观察。
1.3统计方法
应用 SPSS l5.0统计软件对数据进行分析，计数资料采用百分比表示,数据对比采取χ2校验。
2结果
2.1等位基因分布频率
对两组受试者等位基因分布频率进行比较，发现E2，E3，E4分布频率相差不大，差异无统计学意义(P＞0.05)，见表1。
2.2ApoE基与脑梗死并发症的关系
将试验组中的50例并发脑梗死者与50例无并发症者进行比较，发现并发脑梗死组21例携带E4基因，无并发症组7例携带E4基因，差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。
3讨论
载脂蛋白是一种关系到体内脂蛋白转运的多态性蛋白，其多态性与机体多种疾病有着密切关系。其具有多态性的原因主要是载脂蛋白基因的多态性与基因多样性表达。目前，关于载脂蛋白E基因多态性与疾病的关系已成为研究的热点[4]。在该研究中设置了对照实验，其中对照组为100名健康者，试验组为100例2型糖尿病患者，对这200例受试者E2，E3，E4等位基因进行检测。E3为野生型基因而E2和E4为突变型基因，突变型基因与人体内血脂的含量有着密切的关系[5-6]。E2基因所表达的载脂蛋白与低密度脂蛋白的亲和力较低而E4基因表达产物与低密度脂蛋白的亲和力较高[7-8]。E4与低密度脂蛋白以及胆固醇的高亲和力，大大降低了体内血脂的代谢速度，从而使血脂含量较高，随后通过高血脂来促进脑梗死的病发，而E4与2型糖尿病的发生并无直接关系[9-10]。在该实验中，对两组检测结果进行比较，对照组和试验组等位基因分布频率相差不大，差异无统计学意义（P＞0.05）；患者低密度脂蛋白与胆固醇含量在携带E4等位基因的患者中最高，在携带E2等位基因的患者中最低，差异有统计学意义（P＜0.05）。且并发脑梗死的患者E4等位基因的携带率高，无并发脑梗死的患者E4等位基因的携带率低，差异有统计学意义（P＜0.05）。
综上所述， 2型糖尿病高脂血症及其并发脑梗死与E4等位基因的携带有密切的关系。
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参考文献
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（收稿日期：2014-07-28）