曾艳 周蓉
沈阳医学院附属第二医院，辽宁沈阳110035
[摘要] 目的 研究骨桥蛋白在子宫颈癌组织中表达及其与宫颈癌侵袭转移的关系。方法 选取2010年5月—2013年5月该院病理科保存的宫颈病变手术切除组织蜡块120例，均进行免疫组化检测OPN的表达情况。结果 宫颈癌组织中OPN阳性表达率为64.8%（35/54），宫颈上皮內瘤变组织中OPN阳性表达率为47.8%（22/46），正常宫颈组织OPN阳性表达率为10.0%（2/20）。3组阳性率差异具有统计学意义（P＜0.05）。OPN蛋白的表达与组织学分化，临床分期及是否有淋巴结转移有关（P＜0.05），而与病理类型无关（P＞0.05）。结论 OPN在宫颈癌组织中有较高表达，且OPN的表达可能与宫颈癌的发生，发展及转移有密切联系。本文也为临床诊断宫颈癌提供一定参考。
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关键词 ] 宫颈癌组织；骨桥蛋白；临床研究
[中图分类号] R737.33[文献标识码] A[文章编号] 1674-074２（２０１4）04（b）－０194-02
[作者简介] 曾艳 （1978.5-），女，辽宁沈阳人，硕士研究生，主治医师，研究方向：妇产科。
宫颈癌为女性常见生殖道恶性肿瘤，其发生，发展及转移与多种临床病理因素有关，如淋巴结转移，组织学类型及临床分期等[1]。骨桥蛋白为一种磷酸化糖蛋白，广泛分布与全身各组织中，主要参与外分泌和粘附功能的调节。研究表明骨桥蛋白在肿瘤的发生，发展及转移密切相关，而且在胃癌，肺癌及食管癌等恶性肿瘤中呈上调表达。关于骨桥蛋白在宫颈癌组织中研究少见报道[2-4]。该研究对2010年5月—2013年5月期间应用免疫组化的方法检测了骨桥蛋白在宫颈癌组织中的表达，以研究其在宫颈癌发生，发展及侵袭转移中的作用，现报道如下。
1资料与方法
1.1临床资料
选取该院病理科保存的宫颈病变手术切除组织蜡块120例，其中宫颈癌组织54例，宫颈上皮內瘤变组织（CIN）46例，正常宫颈组织20例，所有患者术前均未接受任何放射及化学治疗。其中鳞癌39例，腺癌15例；临床分期（根据国际妇产科联盟2000年的标准）：Ⅰ期29例，Ⅱ期16例，Ⅲ-Ⅳ期9例；病理分级：低分化者10例，中分化者27例，高分化者17例；有淋巴结转移者20例，无淋巴结转移者34例。
1.2试剂与方法
鼠抗人OPN抗体购自美国Santa Cruz公司，，辣根过氧化物酶标记二抗及DAB染色试剂盒均购自武汉博士德公司。
采用免疫组化的方法检测骨桥蛋白的表达。石蜡切片脱蜡，3%双氧水室温下孵育10 min以消除内源性过氧化物酶活性。修复抗体并PBS缓冲液冲洗。5%~10%山羊血清封闭，室温孵育20~30 min。加入一抗，4 ℃过夜。PBS冲洗，加入辣根过氧化物酶标记二抗，37 ℃孵育10~30 min，PBS缓冲液冲洗。加入SABC，37 ℃孵育10~30 min。加DAB，复染，脱水，封片。
1.3结果判定
切片制作完成后先观察整体染色，而后于400倍镜下随机选取五个视野，固定窗口面积，最后用细胞计数软件计数。OPN阳性表达为棕黄色颗粒，主要定位于细胞质及细胞膜。细胞显色计分：细胞无显色为0分；细胞为浅黄色为1分；细胞为棕黄色为2分；细胞为棕褐色为3分；阳性细胞比例计分：无阳性细胞为0分；细胞阳性＜25%为1分；细胞阳性率在25%~50%之间为2分；细胞阳性率＞50%为3分。将上述两项计分相加，其中总分＜3分为阴性，总分≥3分为阳性。
1.4统计方法
应用SPSS13.0软件进行数据统计与分析，计数资料采用χ2检验。
2结果
宫颈癌组织中OPN阳性表达率为64.8%（35/54），宫颈上皮內瘤变组织中OPN阳性表达率为47.8%（22/46），正常宫颈组织OPN阳性表达率为10.0%（2/20）。3组阳性率差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。
OPN蛋白的表达与组织学分化，临床分期及是否有淋巴结转移有关（P＜0.05），而与病理类型无关（P＞0.05）。
3讨论
OPN为一种分泌性结合磷酸化糖蛋白，广泛分布于全身各组织中，主要参与为分泌和粘附功能的调节。目前研究表明OPN在乳腺癌，胃癌及肺癌等肿瘤中有较高表达，其可能作用机制为，OPN可能可激活癌基因的表达，从而抑制细胞凋亡，进而促进细胞粘附，介导肿瘤细胞逃逸等过程，最终导致细胞癌变[5-7]。
在该研究中，宫颈癌组织中OPN阳性表达率为64.8%，宫颈上皮內瘤变组织中OPN阳性表达率为47.8%，正常宫颈组织OPN阳性表达率为10.0%，OPN在宫颈组织中的阳性表达率随宫颈组织病情及癌变进展而升高，这说明OPN的高表达于宫颈癌的进展有密切联系，因此OPN可作为判断宫颈癌预后的标志物。该研究也发现OPN的表达与患者宫颈癌临床分期及有无淋巴结转移有有关，这说明OPN在细胞内信号转导途径中有一定作用，OPN的上调表达影响了细胞内信号转导途径，抑制了细胞凋亡，加快了细胞生长速度，从而导致细胞癌变[8-10]。
综上，OPN在宫颈癌组织中有较高表达，且OPN的表达可能与宫颈癌的发生，发展及转移有密切联系。本文也为临床诊断宫颈癌提供一定参考。
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（收稿日期：2014-01-06）