陶兴魁 陈 峰 赵志祥 张曼曼 操 莉
（宿州学院生物与食品工程学院，安徽 宿州 234000）
【摘 要】本文以蓝莓茎段为外植体，以WPM为基本培养基，通过添加不同配比的TDZ、ZT、6-BA、2,4-D植物激素，探讨蓝莓外植体诱导愈伤组织。研究结果表明：2,4-D对蓝莓茎段诱导愈伤组织效果最佳，最适浓度为1.0 mg/L。
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关键词 植物激素；蓝莓幼茎；愈伤组织诱导
基金项目：安徽省大学生创新创业项目（201310379045）；宿州学院特色种植业苗种生产工程技术研究中心开放课题（2014XKF19）。
作者简介：陶兴魁（1983—），男，安徽淮北人，硕士，研究方向为植物生物技术。
0 引言
蓝莓（Blueberry）又名越橘、蓝浆果，属杜鹃科（Ericaceae）越橘属（Vaccinium）。蓝莓果实风味独特，营养丰富，含有丰富的维生素、矿物质和抗氧化物质，特别是其中所含的花青素、儿茶酸，有防治高血压、疏通毛细血管和缓解视力疲劳的作用，被誉为“浆果之王”，被国际粮农组织列为人类五大健康食品之一[1-2]。对于蓝莓茎段诱导植株再生的研究比较多，并且获得了丰厚的成果，技术比较成熟[3-5]，但以蓝莓外植体诱导愈伤组织的研究几乎没有。韩婷婷等以WPM1/2为适宜培养基使矮丛蓝莓Blomidon品种的试管苗叶片诱导愈伤率高达100%[6]。因此，本实验以蓝莓幼茎作为外植体，研究不同植物激素诱导蓝莓愈伤组织的情况，为蓝莓组培快繁提供参考。
1 材料与方法
1.1 材料
以高丛蓝莓瑞卡幼茎作为外植体，以改良WPM培养基为培养基，设定蔗糖浓度为30g/L，琼脂8g/L，PH为5.5，在宿州学院东区组培室内进行培养。
1.2 方法
1.2.1 材料处理
剪下蓝莓幼茎后流水冲洗2h，之后在无菌操作台上进行消毒和灭菌。用70%酒精消毒30s，无菌水冲洗3次，0.05%氯化汞灭菌6~8min，无菌水冲洗8次，然后将幼茎用无菌滤纸吸干水分，备用。
１.2.2 愈伤组织的诱导
将幼茎的两端分别减去一小部分，横放于含有不同浓度激素组合的改良WPM培养基中，每瓶接种5~6个茎段，分别添加TDZ，ZT， 6-BA，2,4-D各0.5mg/L、1.0mg/L、1.5mg/L、2.0mg/L、2.5mg/L五个浓度梯度做单因素五水平实验，每种浓度接种10瓶，45d后统计出愈率和愈伤组织长势，旨在选出幼茎诱导愈伤组织最适宜的植物激素，并探讨每种植物激素对愈伤组织诱导的影响。
2 结果与分析
2.1 不同浓度的TDZ对蓝莓幼茎愈伤组织诱导的影响
统计结果表明，TDZ对蓝莓幼茎愈伤组织诱导的效果不好，愈伤率很低，而且基本全部褐化。
2.2 不同浓度的ZT对蓝莓幼茎愈伤组织诱导的影响
实验结果表明，ZT对蓝莓茎段诱导愈伤组织效果不好，当浓度大于1.0 mg/L时开始出芽，当浓度大于1.5 mg/L时愈伤组织褐化现象严重。
2.3 不同浓度的2,4-D对蓝莓幼茎愈伤组织诱导的影响
实验结果表明，当2,4-D浓度为0.5~1.0 mg/L时诱导处的愈伤组织均为绿色、疏松颗粒状愈伤组织，当浓度大于1.5时，随着2,4-D浓度的增大愈伤率随之提高，但褐化率也随之增大。
2.4 不同浓度的6-BA对蓝莓幼茎愈伤组织诱导的影响
统计结果表明，当6-BA浓度为0.5 mg/L时，无愈伤组织诱导产生，当6-BA浓度大于1.0mg/L时有愈伤组织产生，但有芽诱导产生而且还有褐化现象。
从以上实验得知： TDZ对蓝莓幼茎诱导愈伤组织时褐化现象严重，并且浓度越大褐化越严重，当其浓度在1.0mg/L以上时褐化率超过50%，同时愈伤率也不高； 低浓度的ZT对蓝莓幼茎诱导愈伤组织效果不好，高浓度时出现出芽和褐化现象；使用6-BA时对愈伤组织诱导作用最小，愈伤率很低，褐化率也较低。使用2,4-D时愈伤率最高，褐化率也较低，当其浓度为1.0mg/L时诱导效果最好，诱导出的愈伤组织为淡黄色的疏松颗粒状较大的愈伤组织。
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参考文献
［１］修英涛,常凤英,姜河,等.我国蓝莓(越橘)栽培研究现状及发展措施[J].辽宁农业科学,2003(3):21-23.
［２］刘庆忠,赵红军,郑亚芹,等.高灌蓝莓微体繁殖技术研究初报[J].落叶果树, 2001(5):1-3.
［３］王连润,马钧,胡忠荣,李坤明.蓝莓离体快速繁殖研究[J].红河学院学报,2009(10):17-18.
［４］周历萍,王淑珍,来文国.蓝莓组织培养技术研究[J].杭州农业与科技,2011(3):30-31.
［５］王淑珍,来文国.南高丛蓝莓组培再生技术研究[J].现代农业科技,2011,(21):119-120.
［６］韩婷婷,孙周平.矮丛蓝莓叶片的愈伤组织诱导及植株再生[J].西北植物学报,2010,30(3):0615-0620.
［责任编辑：杨玉洁］