吴 燕，姜 瑞，牛 艳，赵子丹
（宁夏农林科学院质量标准与检测技术研究所，银川 750002）
摘要：为准确分析辣椒及土壤中二氰蒽醌残留量，建立了高效液相色谱（HPLC）分析方法。样品用酸性乙腈提取，用弗罗里硅柱净化，以乙腈－水为流动相（7∶3，V/V），SB－C18为固定相，在254 nm下，以外标法定量。结果表明，该方法检出限为9．5 μg/kg，平均回收率在75.3％～93.2％之间，相对标准偏差为1．4％～5．0％，该方法快速、准确度高，适用于辣椒及土壤中二氰蒽醌残留量的测定。
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关键词 ：高效液相色谱（HPLC）； 二氰蒽醌； 辣椒； 土壤； 残留
中图分类号：O657．7＋2 文献标识码：A 文章编号：0439－8114（2015）06－1469-02
DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.06.048
Determination of Dithianon Residue in Pepper and Soil with HPLC
WU Yan， JIANG Rui， NIU Yan， ZHAO Zi－dan
（Institute of Quality Standards and Testing Technology Research，Ningxia Academy of Agriculture and Forestry Sciences，
Yinchuan 750002， China）
Abstract： The method of detecting the residue of dithianon in pepper and soil with HPLC were established． Samples were extracted with acidified acetonitrile， then purified by the column of florisil． The external standard method of quantitative HPLC was performed on the column of SB－C18 with the mobile phase of acetonitrile－water （V/V＝7/3） at 254 nm． The results showed that the detect limit was 9．5 μg/kg， with the recovery of 75.3％～93.2％ and the RSD of 1．4％~5．0％． This method is fast and accurate for determining dithianon residue in pepper and soil．
Key words： HPLC； dithianon； pepper； soil； residue
收稿日期：2014－06－30
基金项目：农业部农药残留课题资助项目（2012F062）
作者简介：吴 燕（1985－），女，宁夏中宁人，实验师，主要从事农产品质量安全及农药残留分析工作，（电话）18695289366（电子信箱）
wfsnow＿1985@163．com；通信作者，姜 瑞，实验师，主要从事农产品质量安全及农药残留分析工作，（电话）13895014243（电子信箱）
jr117416@sina．com。
二氰蒽醌（Dithianon）又名二噻农，是一种保护性杀菌剂，通过干扰细胞呼吸链抑制真菌生长和繁殖。可防治苹果、梨黑星病，苹果轮纹病，攫桃锈病、炭疽病，柑橘疮痂病、锈病，草莓叶斑病等［1－3］。随着二氰蒽醌的广泛使用，其在农作物和环境中残留导致的健康风险也越来越引起关注。采用快速准确的二氰蒽醌残留分析方法是评价其健康风险的技术保障。目前，二氰蒽醌残留的分析方法一般采用基于QuEchERS（Quick、Easy、Cheap、Effective、Rugged、Safe）前处理的高效液相色谱分析方法［4－7］。本研究在此基础上建立了以酸性乙腈为提取剂，通过弗罗里硅柱净化，采用HPLC－UV测定辣椒和土壤中二氰蒽醌残留的分析方法，该方法操作简单、准确，可为评价二氰蒽醌在蔬菜和土壤中的残留水平提供技术参考。
1 材料与方法
1．1 材料与试剂
土壤样品除去碎石、杂草，过筛。辣椒打成浆状，备用。
乙腈、丙酮、正己烷、二氯甲烷（色谱纯，美国Fisher公司），Florisil固相柱（500 mg，美国Agilent公司），二氰蒽醌原药（≥96％，江西禾益化工有限公司），硫酸（≥96％，氯化钠等均为分析纯，购于国药试剂公司）。
1．2 仪器设备
20A高效液相色谱仪，配备紫外检测器（日本岛津）；PL202－L型电子天平（瑞士梅特勒－托利多）；T18型匀浆机（德国IKA）；R－215型旋转蒸发器（瑞士步琪）；TD－40L型离心机（上海安亭科学仪器厂）。
1．3 方法
1．3．1 辣椒样品分析 称取辣椒样品10．0 g于50 mL离心管中，加入1．0 mol/L硫酸2 mL，再加入20 mL乙腈，高速匀浆2 min，加入3．0 g氯化钠，加盖，振摇约1 min后，于4 000 r/min离心5 min，取上清液5 mL浓缩近干，加入2．0 mL二氯甲烷溶解残渣。依次用5．0 mL二氯甲烷、丙酮/正己烷（5∶95，V/V，下同）预淋洗Florisil小柱，待液面近干时，将溶液加入Florisil小柱，重复2次，并用20．0 mL上述丙酮/正己烷洗脱，洗脱液浓缩近干，2．5 mL乙腈定容，过0．22 μm微孔滤膜，待测。
1．3．2 土壤样品分析 称取土壤样品10．0 g于50 mL离心管中，加入0．5 mol/L硫酸5 mL，加入20 mL乙腈，振荡30 min，加入3．0 g氯化钠，加盖，振摇1 min，于4 000 r/min离心5 min，取2 mL上清液，过0．22 μm微孔滤膜，待测。
1．3．3 液相色谱条件 采用Agilent ZORBAX SB－C18色谱柱（4．6 mm×250 mm，5 μm），检测波长254 nm，流动相为乙腈－水（7∶3，V/V），流速1．0 mL/min，进样量5 μL。
2 结果与分析
2．1 标准工作曲线
取不同浓度的二氰蒽醌标准溶液在色谱条件下测定（图1）。以二氰蒽醌标准溶液浓度与相对应的峰面积作线性分析，得回归曲线y＝19 395x－323，相关系数（r）＝0．999 9（n＝7），表明在此范围内呈良好的线性关系。
2．2 回收率和精密度
分别在辣椒和土壤样品中添加0．05、0．20、1．00 mg/kg二氰蒽醌标准溶液，设5个平行，同上法测定回收率（表1和图2）。结果表明，辣椒中平均回收率为75．3％～83．0％，变异系数为1．4％～4．0％；土壤中平均回收率为91．8％－93．2％，变异系数为0．8％～5．0％，回收率、精密符合检测要求。根据3倍噪音水平，确定检出限为9．5 μg/kg。
3 结论
建立用酸性乙腈提取，弗罗里硅柱净化的前处理方法和高效液相色谱－紫外检测器测定辣椒和土壤中二氰蒽醌残留量的检测方法，并分析了方法回收率、精密度。该方法能有效去除色素干扰，具有较好的精密度和准确度，符合农药残留分析要求［8］。
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参考文献：
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